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更新時間:2017-07-06 09:53:50瀏覽次數:114次
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福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
甲苯胺藍染色液(細胞)50ml免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
甲苯胺藍染色液(細胞)50ml免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
甲苯胺藍染色液(細胞)50ml免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
SiHa(人子宮頸鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2
敘利亞倉鼠細胞系;Syrian Hamster AV12
EDAR Others Cynomolgus 食蟹猴 EDAR 人細胞裂解液 (陽性對照)
Calu-3細胞,人肺腺癌細胞(胸膜滲出液) 大鼠肝星形細胞,CFSC-8B細胞 CM-M089小鼠皮膚肥大細胞*培養(yǎng)基100mL
真皮成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
HUVEC-c 單一來源的人臍靜脈內皮細胞(HUVEC) 500,000cells 表皮角化細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CM-R053大鼠卵巢上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠顆粒細胞RGC
NCI-H1703[H1703]細胞,人肺癌細胞 人膀胱癌細胞,5637(HTB-9)細胞 人視網膜色素上皮細胞HRPEpiC
貂源細胞
MMP7 Others Human 人 MMP7 人細胞裂解液 (陽性對照)
IL12A Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人骨骼肌衛(wèi)星細胞cDNAHSkMSC cDNA
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-3C8
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A5 *(含100mL 酶解緩沖液) 10mL
細胞名稱 種屬
AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人相關血漿蛋白A(PAPP-A)免疫試劑盒 Human PAPP-A ELISA Kit
Mousekeratinocyteautocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit小鼠角化細胞內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
IGF-I(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
HumanNeonatalThyroxine,NN-T4ELISA試劑盒人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanProteinkinaseA,PKAELISAKit人蛋白激酶A(PKA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat growth hormone releasing peptide ghrELISA Kit 大鼠生長激素釋放肽ghrELISA試劑盒
HumanProcalcitonin,PCISAKit 人降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancellularfibronectin,cFnELISA試劑盒人細胞纖維連接蛋白(cFn)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉基因玉米MON802品系基因檢測試劑盒20次
humanserumamyloidA3,SAA3ELISAKit人血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲苯胺藍染色液(細胞)50ml免費代測人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人視網膜母細胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*誘導基因/RIG-1樣受體(RLR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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