當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>細胞染色>> 甲苯胺藍染色液(軟骨)50ml實驗方法
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更新時間:2017-07-06 09:54:21瀏覽次數(shù):216次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實驗方法
福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
甲苯胺藍染色液(軟骨)50ml實驗方法SK-BR-3(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS2
IFNA8 Others Cynomolgus 食蟹猴 Interferon alpha-B / IFNA8 人細胞裂解液 (陽性對照)
Calu-6細胞,人肺癌細胞系(未分化) 大鼠肝星形細胞,CFSC-2G細胞 CM-M097小鼠皮下脂肪細胞*培養(yǎng)基100mL
原代腎實質(zhì)細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml
HUAEC-c 人臍動脈內(nèi)皮細胞(HUAEC) 500,000cells 腸靜脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
甲苯胺藍染色液(軟骨)50ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
甲苯胺藍染色液(軟骨)50ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
甲苯胺藍染色液(軟骨)50ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
CM-R039大鼠胃粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人臍帶間充質(zhì)干細胞HUMSC
猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細胞;RF/6A 膠質(zhì)瘤細胞,SHG44細胞 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤細胞)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY1002
NOG Others Human 人 Noggin / NOG 人細胞裂解液 (陽性對照)
BACE2 Others Mouse 小鼠 BACE2 / Beta secretase 2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人骨骼肌衛(wèi)星細胞RNAHSkMSC miRNA5 μg
人主動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
S-180細胞,小鼠門肉瘤細胞 THP-1(單核細胞白血病) 人細胞;C-33A
集落刺激因子
SW579(人甲狀腺鱗癌細胞 ) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠Ⅻ型膠原(COL12)ELISA試劑盒 ,英文名: COL12 ELISA Kit
人相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA檢測試劑盒HumanpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit 96T/48T
大鼠肺炎病毒抗體(PV-Ab)免疫試劑盒 Rat Pneumonia Virus Antibody,PV-Ab Elisa kit
CLIAKitforu-T3ELISAKit大鼠高敏三碘甲狀腺原氨酸規(guī)格:48T/96T
擬南芥葉片原生質(zhì)細胞分離試劑盒5次
ELISAKitTH人*羥化酶規(guī)格:48T/96T
小鼠β酚(β-naphthol)LISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human vitamin B12 (VB12) ELISA Kit 人維生素B12(VB12)ELISA試劑盒
Humananti-cartilage-antibodyELISAKit 人抗軟骨抗體(anti-cartilage-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCentromereProtein,CENP-BELISA試劑盒人著絲粒蛋白B(CENP-B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因玉米MON809品系基因檢測試劑盒20次
HumanSerumamyloidA,SAAELISAKit人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲苯胺藍染色液(軟骨)50ml實驗方法人*結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人食欲素受體(OXR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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