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更新時間:2017-07-06 09:59:17瀏覽次數(shù):283次
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福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
TTC染色液(2%)50ml使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
TTC染色液(2%)50ml使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
SW620(人結(jié)腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-B1
TPM4 Others Human 人 TPM4 / Tropomyosin 4 人細胞裂解液 (陽性對照)
Z-HL16C細胞,人胚肺成纖維細胞突變癌細胞 非洲綠猴腎細胞,COS-6細胞 CL-0074DLD-1(人結(jié)腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×2
腎實質(zhì)細胞Many types of cells包裝:5 ×105次方(1ml)
HPAEC-c 人肺動脈內(nèi)皮細胞(HPAEC) 500,000cells 顱蓋造骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CL-0309TG-905(人腦膠質(zhì)母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
HA Others H7N7 甲型流感 H7N7 (A/Netherlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人神經(jīng)元總RNAHN tRNA
SHG44細胞,膠質(zhì)瘤細胞 人SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細胞,WI-38AV13細胞 膀胱成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
豹貓皮膚成纖維樣細胞;LCS5
FLT4 Others Human 人 VEGFR3 / FLT4 人細胞裂解液 (陽性對照)
IL18RAP Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18RAP 人細胞裂解液 (陽性對照)
人黑色素瘤細胞;A875
人肝竇內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
LLC細胞,小鼠肺癌細胞 CHO(中國倉鼠卵巢細胞) 恒河猴肺細胞;RM-L1
PPBP Protein Rat 重組大鼠 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 標簽)
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 FSTL1 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒 ,英文名: VWF ELISA Kit
人腺病毒IgG(ADV-IgG)ELISA檢測試劑盒HumanAdenovirusIgG,ADV-IgGELISAKit 96T/48T
大鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)免疫試劑盒 Rat GATA binding protein 4,GATA4 ELISA Kit
CLIAKitforsLRELISAKit大鼠可溶性瘦素受體規(guī)格:48T/96T
軟瓊脂細胞克隆試劑盒10/20次
ELISAKitALP人堿性磷酸酶規(guī)格:48T/96T
小鼠α*S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat dihydrotestosterone (DHT) ELISA Kit 大鼠雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒
HumanPregnancySpecificβ1Glycoprotein,SP1/PSβ1-GELISAKit 人特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancholinephosphoglyceride,PC/CPGELISA試劑盒人*磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
總膽汁酸(TBA)定量檢測試劑盒20次
HumanscavengerreceptorB,SRBELISAKit人清道夫受體B(SRB/CD36)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
TTC染色液(2%)50ml使用說明書人乳鐵蛋白(LF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTFAb-Ig)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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