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草酸銨結(jié)晶紫染色液100ml免費代測

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更新時間:2017-07-07 11:25:44瀏覽次數(shù):145次

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草酸銨結(jié)晶紫染色液100ml免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
草酸銨結(jié)晶紫染色液100ml免費代測注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
U-87 MG(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swiss albino

BTC Others Cynomolgus 食蟹猴 BTC / Betacellulin 人細胞裂解液 (陽性對照)

16HBE細胞,人支氣管上皮細胞 化學轉(zhuǎn)化小鼠鼻咽上皮細胞,TMNE細胞 CL-0178OVCAR-3(人卵巢癌細胞)5×106cells/瓶×2

淋巴管內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

HVMF-c 人類絨毛間質(zhì)成纖維細胞(HVMF) 500,000cells 腎系膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
臍靜脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/common magpie/Hong Kong/5052/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠正常肝細胞;NCTC 1469 [NCTC1469]

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA 小鼠神經(jīng)細胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細胞,NG108-15[108CC15]細胞 LM8細胞,C3H小鼠骨肉瘤細胞

人胚肺成纖維細胞;MRC-5

AXL Others Human Axl Kinase 人細胞裂解液 (陽性對照)
18. 卵巢細胞系統(tǒng)

人急性T淋巴細胞性白血病細胞;I 2.1(CRL-2572)

CM-R072大鼠腎管狀上皮細胞*培養(yǎng)基100mL

小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH2 小鼠腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Mouse

KIT Others Mouse 小鼠 c-kit / CD117 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠血小板反應蛋白/*敏感蛋白1(TSP-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人纖維膠凝蛋白3(FCN3)免疫試劑盒 Human FCN3 ELISA Kit

超氧陰離子測試盒 可見分光光度法 50/24

RatMyoglobin,MYO/MBELISA試劑盒大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanhepatocytegrowthfactor,HGFELISA試劑盒人肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanluteotropichormone,LHELISAKit*(LH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠TH糖蛋白(THP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat carbonic anhydrase (CA) ELISA Kit 大鼠碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒

HumanInsulin,INSELISAKit 人胰島素(INS)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanclusterOfdifferentiation,CDl4ELISA試劑盒人CD14分子(CDl4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組蛋白脫乙?;?/span>2(HDAC2)活性比色法定量檢測試劑盒20

Humanrheumatoidarthritisassociatednuclearartigen,RANAELISAKit人抗類風濕關(guān)節(jié)炎核抗原(RANA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
草酸銨結(jié)晶紫染色液100ml免費代測人葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶(GPI)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人破傷風抗體(TetanusAb)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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