當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞染色>> 甲基綠-派絡(luò)寧染色液50ml免費代測
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更新時間:2017-07-07 11:26:31瀏覽次數(shù):136次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細(xì)胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實驗方法
福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
甲基綠-派絡(luò)寧染色液50ml免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
甲基綠-派絡(luò)寧染色液50ml免費代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
甲基綠-派絡(luò)寧染色液50ml免費代測實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
VCaP(人前列腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
綠色熒光蛋白標(biāo)記人胃癌細(xì)胞;MGC803-GFP
LTBR Others Rat 大鼠 LTBR / TNFRSF3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
786-O細(xì)胞,人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞,CMT93細(xì)胞 CL-0202Saos-2(人骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
虹膜色素上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
NHEM.f-c M2 正常人表皮黑素細(xì)胞(NHEM)少年,M2培養(yǎng)液中培養(yǎng) 500,000cells 視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
前列腺癌組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/ Yamaguchi/7/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株;L7912
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO Hu 164 SCF 17 腹水瘤細(xì)胞,SAC-IIC3細(xì)胞 EMT6細(xì)胞,小鼠細(xì)胞
人上皮細(xì)胞;MCF-10A
ACVR2A Others Mouse 小鼠 ACVR2A / ActrIIa 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞;MOLT-4
CM-H110人皮膚肥大細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
5-8F, 人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞系 淋巴瘤,EL4IL-2細(xì)胞 PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤)
小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11
PDGFRB Others Human 人 CD140b / PDGFRB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠血栓素B2(TXB2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
*(Fb)免疫試劑盒 Human Fibrinogen,FB ELISA Kit
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RatN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISA試劑盒大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanHerpessimplexvirusⅡantibody,HSVⅡ-AbELISA試劑盒人單純皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanlymphocytefactorELISAKit人淋巴細(xì)胞因子ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠Qa淋巴細(xì)胞抗原2(Qa-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat glycated hemoglobin A1c (GHbA1c) ELISA Kit 大鼠糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA試劑盒
HumanFreeThyroxine,FT4ELISAKit 人游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
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組蛋白脫乙酰化酶5(HDAC5)活性比色法定量檢測試劑盒20次
HumanRetinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit人*結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲基綠-派絡(luò)寧染色液50ml免費代測人*Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*Ⅸ(FⅨ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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