堿性亮綠染色液(2%)100ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
堿性亮綠染色液(2%)100ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
堿性亮綠染色液(2%)100ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
Vero(非洲綠猴腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]

TNFSF8 Others Rat 大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

HBZY-1細(xì)胞，人腎小球髓母細(xì)胞 大鼠埀體瘤細(xì)胞,GH3細(xì)胞 CL-0210SiHa(人子宮頸鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

NHEM-c M2 adult 正常人表皮黑素細(xì)胞(NHEM)成年捐獻(xiàn)者(M2培養(yǎng)液中培養(yǎng)) 500,000cells 胎盤羊膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
CM-H020人胰島β細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

*(含10mL 酶解緩沖液) 1mL

U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7](慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7] (lentiviral construct stable strain) of human brain glioma cells 1640+10%Hyclone 滅活血清+2μg/ml puromycin

IL21 Protein Rat 重組大鼠 IL21 / Interleukin 21 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人表皮角質(zhì)細(xì)胞-新生兒(HEK-n)( 5×105 ) 細(xì)胞名稱 種屬
PPP3R1 Others Human 人 PPP3R1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人急性早幼粒白血病細(xì)胞;HL-60

CL-0437SF763(人腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

細(xì)胞名稱 M-37細(xì)胞 G-7(小鼠骨骼肌肌肉母瘤細(xì)胞)

人細(xì)胞;Hela P10s-11F

DLL4 Others Human 人 DLL4 / Delta4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物(TAFI)免疫試劑盒 Human TAFI ELISA Kit

銅藍(lán)蛋白含量測試盒 可見分光光度法 50管/24樣

RatNeonatalThyroxine,NN-T4ELISA試劑盒大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanHerpessimplexvirusⅠantibody,HSVⅠAbELISA試劑盒人單純皰疹病毒Ⅰ型抗體(HSVⅠAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humanlymphocytefunctionassociatedantigen2,LFA-2ELISAKit人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原2(LFA-2/CD2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat glucocorticoid receptor alpha (GR- alpha) ELISA Kit 大鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA試劑盒

Humanthyroxine,T4ELISAKit 人甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumancoagulationfactorⅢ,FⅢELISA試劑盒人*Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組蛋白脫乙酰化酶6(HDAC6)活性比色法定量檢測試劑盒20次

Humanretinoicacidinduciblegene/RIG-likereceptor,RLR-9ELISAKit人*誘導(dǎo)基因/RIG-1樣受體(RLR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
堿性亮綠染色液(2%)100ml實(shí)驗(yàn)方法人*Ⅷ(FⅧ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人*Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人*Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人*原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝