龍膽紫水溶液(0.5%)100ml免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
龍膽紫水溶液(0.5%)100ml免費(fèi)代測(cè)操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
龍膽紫水溶液(0.5%)100ml免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
A-498(人腎癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

人成骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2

TSPAN8 Others Human 人 TSPAN8 / Tetraspanin 8 / TM4SF3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

AD293細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞 牛胚氣管細(xì)胞,EBTr(NBL-4)細(xì)胞 CL-0303PATU8988(人胰腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

膀胱上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

HNEpC-c 人鼻粘膜上皮細(xì)胞(HNEpC) 500,000cells 支氣管成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
魚源細(xì)胞

HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

II型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL

U-373MG-EGFP(Ubc-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 U-373MG-EGFP (Ubc-EGFP lentiviral construct stable strain) of human brain glioma cells DMEM+10% FBS

IL2 Protein Mouse 重組小鼠 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

人成纖維母細(xì)胞-新生兒(HDF-n)( 5×105 ) MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞 Mouse
PARP1 Others Mouse 小鼠 PARP-1 / PARP 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人間充質(zhì)干細(xì)胞-骨髓總RNAHMSC-bm tRNA

家貓肺細(xì)胞;FCA-L1

HCCC-9810細(xì)胞，膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞 *系,HL細(xì)胞 小鼠肝癌細(xì)胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]

小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;W6/32

RTN4R Others Mouse 小鼠 Nogo Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人纖連蛋白(FN)自身抗體免疫試劑盒 Human fibronectin(FN)antoantibody ELISA kit

植物總酚測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣

RatNeuron-specificenolase,NSEELISA試劑盒大鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanHighdensitylipoproteincholesterol,HDL-CELISA試劑盒人高密度脂蛋白*(HDL-C)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humanlymphotoxinβ,LTBELISAKit人淋巴毒素β(LTB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat dehydroepiandrosterone (DHEA) ELISA Kit 大鼠脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒

HumanProgesterone,PROGELISAkit 人孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCollagenTypeⅡ,ColⅡELISA試劑盒人Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶活性直接比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

HumanReceptorⅠfortheFcregionofimmunoglobulinG,FcγRⅠELISAKit*GFc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
龍膽紫水溶液(0.5%)100ml免費(fèi)代測(cè)*重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

*重鏈(IgH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

*樣轉(zhuǎn)錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

*輕鏈lambda(λ-IgLC)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝