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更新時間:2017-07-07 11:32:55瀏覽次數(shù):124次
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福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
結晶紫飽和酒精溶液100ml免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
結晶紫飽和酒精溶液100ml免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
BC-019(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0904
NTRK1 Others Rat 大鼠 TrkA / NTRK1 人細胞裂解液 (陽性對照)
AAV-293細胞,人人胚腎細胞 大鼠心肌細胞,H9c2(2-1)細胞 CL-0332Dami(人巨核細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2
原代肝實質細胞特制基礎無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100ml
HMEpC-c 人類上皮細胞(HMEpC) 500,000cells 人神經(jīng)細胞HN
成纖維細胞培養(yǎng)基FM-sf-prf
HA Others H2N2 甲型流感 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
人EB病毒轉化的B細胞;CGM1
正常大鼠腎細胞;NRK 結腸腺癌細胞,COLO-320細胞 ST細胞,豬細胞系(ST)
Ca Ski, 人細胞 Human
HAVCR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 HAVCR1 / TIM1 / TIMD1 人細胞裂解液 (陽性對照)
THOP1 Others Mouse 小鼠 THOP1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人角膜上皮細胞cDNAHCEpiC cDNA
大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-1
MGC80-3細胞,胃癌細胞 人喉癌細胞,TU212細胞 正常大鼠腎細胞;NRK
雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12
RSPO1 Others Human 人 R-Spondin 1 / RSPO1 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠補體成分4b(C4b)ELISA試劑盒 ,英文名: C4b ELISA Kit
人纖調蛋白(fibromodulin)ELISA檢測試劑盒HumanfibromodulinELISAKit 96T/48T
大鼠類風濕因子(RF)免疫試劑盒 Rat Rheumatoid Factor,RF ELISA Kit
英文名稱RatAZISAKit大鼠*(AZT)規(guī)格:96T/48T
結晶紫細胞群落染色試劑盒250次
ELISAKitGAP-43人生長相關蛋白43規(guī)格:48T/96T
小鼠IgG Fc片段(IgGFcγ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat advanced glycation end products (AGEs) ELISA Kit 大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒
HumanThromboxaneB2,TX-B2ELISAKit 人血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCollagenaseTypeIIELISA試劑盒人膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織ABL1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanReceptorⅢfortheFcregionofimmunoglobulinG,FcγRⅢELISAKit*GFc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
結晶紫飽和酒精溶液100ml免費代測人美麗線蟲凋亡基因(CED-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人錨蛋白(ankyrin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人毛細血管擴張性共濟失調突變基因(ATM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人蛋白IgA(Gliadin-IgA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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