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更新時間:2017-09-06 13:19:57瀏覽次數(shù):402次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0909圖片培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實現(xiàn)為科學研究提供實驗細胞技術服務。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于我們的技術條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉讓及使用細胞的時候要遵守國內(nèi)外有關的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風險和責任,采取適當?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。
細胞名稱 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0909圖片
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞系來源于一重度少精癥男性患者的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0909圖片細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
ALPI Others Human 人 Alkaline Phosphatase / ALPI 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0199RSC96(大鼠雪旺細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠食管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
MDCK[NBL-2]狗腎上皮細胞 MDCK[NBL-2] canine kidney epithelial cells MEM+10% FBS
白細胞介素-6超家族
R 1610(倉鼠肺細胞) 5×106cells/瓶×2 HL-60(白血病原髓細胞)
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元 Mouse
CM-H023人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠神經(jīng)皮質細胞(RNc)(1×106)
615小鼠癌瘤株;Ca763 小鼠卵巢成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
人胚肺細胞系;KuMA
CES2 Others Human 人 CES2 / Carboxylesterase-2 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0199RSC96(大鼠雪旺細胞)5×106cells/瓶×2
ALPI Others Human 人 Alkaline Phosphatase / ALPI 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠食管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
MDCK[NBL-2]狗腎上皮細胞 MDCK[NBL-2] canine kidney epithelial cells MEM+10% FBS
白細胞介素-6超家族
R 1610(倉鼠肺細胞) 5×106cells/瓶×2 HL-60(白血病原髓細胞)
Anti-RANK/TNFRSF11A/CD265/FITC 熒光素標記核轉錄因子NF-κB受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗大鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
嗜鉻粒素A抗體 Anti-CGA 0.2ml
Rabbit Anti-horse IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗馬IgM 0.1ml
Fibulin 1 英文名稱: “衰老關鍵蛋白”抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PKC beta 1/2 蛋白激酶C beta 1/2抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗大鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
HPV16-E7/E7 protein(Human papillomavirus type 16) 人類狀瘤病毒16抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-ABCF1 ATP結合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-CHK2 (Thr387) 磷酸化細胞周期檢測點激酶2抗體 規(guī)格 0.1ml
兔抗大鼠IgG血清 0.5ml 國產(chǎn)
WISP2 英文名稱: 結締組織生長因子樣蛋白抗體 0.2ml
Phospho-DOK2 (Tyr299) 英文名稱: 磷酸化D酪酸激酶衰減蛋白2抗體 0.1ml
Anti-ABCF1 ATP結合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0909圖片8-OHdG 英文名稱: 8-羥基脫氧鳥苷抗體 0.1ml
phospho-Eph receptor B1 (Tyr928) 英文名稱: 磷酸化酪酸蛋白激酶受體B1抗體 0.1ml
凝血調節(jié)蛋白抗體 Anti-CD141 0.1ml
Anti-Influenza A Virus H1/HRP 辣根過氧化物酶標記羊抗季節(jié)性A型流感病毒H1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-HDAC3 (Ser424) 磷酸化組蛋白去乙?;?/span>3抗體 規(guī)格 0.1ml
GHRP-6 Acetate peptide(Growth hormone-releasing peptides 6) 醋酸促生長激素釋放肽6Multi-class antibodies規(guī)格: 1g
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0909圖片質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
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