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人伯基特淋巴瘤細胞;EB-3培養(yǎng)培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實現為科學研究提供實驗細胞技術服務。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于我們的技術條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉讓及使用細胞的時候要遵守國內外有關的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風險和責任,采取適當的安全和處理措施盡量降低對健康或環(huán)境的危害。
細胞名稱 人伯基特淋巴瘤細胞;EB-3培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞源自一名3歲患有Burkitt's淋巴瘤的黑人男孩的B淋巴細胞,EBNA陽性。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes)
傳代方法 保持細胞密度為3×105cells/ml,每周換液2~3次
傳代情況 P112
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12,15;D13S317:12,14;D16S539:10,12;D18S51:15,17;D19S433:12.2,16.2;D21S11:29;D2S1338:17,22;D3S1358:15,16;D5S818:9,10;D7S820:11;D8S1179:14;FGA:22;TH01:7;TPOX:6,9;vWA:17,19;
同工酶
染色體
使用權限 A類
人伯基特淋巴瘤細胞;EB-3培養(yǎng)細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
人結膜纖維原細胞(HConF)(5×105 )
615小鼠狀肺腺癌瘤株;P615
CM-M027小鼠食管上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
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Hepa 1-6 小鼠肝癌細胞
T24, 人膀胱癌細胞
人神經系統(tǒng)周邊細胞 (HPNC)( 5×105 )
人前列腺癌細胞;PC-3 [PC3] 大鼠卵巢成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
615小鼠癌瘤株;Ca761
CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR 人細胞裂解液 (陽性對照)
人表皮黑色素細胞-深色素RNAHEM-d miRNA5 μg
小鼠腦膜細胞(MMC)(5×105)
綿羊肺細胞;OAR-L1
小鼠Lewis肺癌瘤株;LLT 小鼠前脂肪細胞*培養(yǎng)基 100mL
NIH/3T3, 小鼠成纖維細胞系 Mouse
EFNA4 Others Mouse 小鼠 EFNA4 / Ephrin-A4 人細胞裂解液 (陽性對照)
BeisachangSodiumluriteBrothBase
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人伯基特淋巴瘤細胞;EB-3培養(yǎng)質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,進口來源,保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
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