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更新時間:2017-09-12 10:57:11瀏覽次數(shù):413次
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1)公司努力實現(xiàn)為科學(xué)研究提供實驗細胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關(guān)信息進行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險和責(zé)任,采取適當?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。
細胞名稱 GFP標記的小鼠子細胞;U14-GFP圖片
形態(tài)特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞攜帶綠色滎光蛋白基因,可表達綠色滎光蛋白,可作為報告基因用于外源基因表達研究。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C7
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR 鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
GFP標記的小鼠子細胞;U14-GFP圖片細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
1,4-二氧六環(huán)shēng huà shì jì容量:RT10克
VitaminB2 10g/50g/250g/1kg 國產(chǎn)
鹽還原試劑(甲、乙液)1米
4-安基-3-基-5-巰基-1,2,4-三坐;4-安基-3-基-1,2,4-三坐-5-流;4-安基-5-基-1,2,4-三坐-3-流 4-cMino-3-hydrczino-5-Mqrccpto-1,2,4-triczolq;4-cMino-3-hydrczi,2,4-triczolq-5-thiol;4-cMino-5-hydrczi,2,4-triczolq-3-thiol;Purpcld 1720-1-2
氧化鋁G250克RT
偏硼酸鋰,英文名或英文縮寫:litxium metaborate octahydrate,級別:4N,100-200目,99.99%,規(guī)格:25克
105-99-7己二酸二丁酯;己二酸丁酯;肥酸丁酯Dibutyl adipate;Adipic acid dibutyl ester
丁二醇,英文名或英文縮寫:2,3-Butanediol,級別:BR,99%,規(guī)格:25克
正戊 Butyl cyanide,99.5% 110-59-8 25ML 通用試劑
傘形酮 Umbelliferone (99%) 93-35-6 5G 通用試劑
蔗糖嶙酸化酶,英文名或英文縮寫:Sucrose Phosphorylase,級別:超純,99%,規(guī)格:5克
亞鐵青化內(nèi) wo7ium fqrrocycnidq 14434--1
4-Carboxy-2-chloropxenylboronic acid 851335-09-6
* Puerarin (≥98%,HPLC) 3681-99-0 20MG 標準品
D-酪酸/D-β-對羥基苯基丙酸/D-*基丙酸/D-β-對羥苯基-α-基丙酸/D-干酪基酸/3-(4-羥基苯基)-D-丙酸/D-Tyrosine BR,99% 5克 國產(chǎn)/進口
二氫*還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Beijing/22808/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
A498 腎癌
F98-RFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞 F98-RFP-puro (lentiviral construct stable strain) of rat brain glioma cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin
RSPO1 Protein Human 重組人 R-Spondin 1 / RSPO1 蛋白 (aa 1-146, His 標簽)
人骨骼肌星形細胞(HSkMSC)(5×105) CSC, 小鼠心肌細胞 Mouse
IL6ST Others Rat 大鼠 gp130 / IL6ST / CD130 人細胞裂解液 (陽性對照)
人結(jié)膜成纖維細胞cDNAHConF cDNA
293 人胚腎細胞
CL-0281HELF(人胚肺成纖維細胞)5×106cells/瓶×2
rRTEC, 大鼠腎小管上皮細胞
人干細胞因子單克隆抗體細胞株;AMS2(SCF3) 人子上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
GFP標記的小鼠子細胞;U14-GFP圖片CRT(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
人浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細胞;CCD-1095Sk
CD40LG Others Cynomolgus 食蟹猴 CD40L / CD154 / TNFSF5 人細胞裂解液 (陽性對照)
Caki-1細胞,人腎透明細胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細胞 綠猴猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細胞,RF/6A細胞 CL-0414PC-3M-IE8(人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細胞株)5×106cells/瓶×2
GC-1, 鼠精原細胞
hMNC-PB-c pooledultra-pure 人單核細胞,來自外周血,混合來源,超純 人心臟微血管內(nèi)皮細胞HCMEC
GFP標記的小鼠子細胞;U14-GFP圖片質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供
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