產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱(chēng):苯胺4羥化酶(AH)測(cè)試盒微量法
規(guī)格:100管/48樣
貨號(hào):BJ-01611264-1
檢測(cè)方法:微量法
產(chǎn)品分類(lèi):其它系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月
本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
商品介紹:
測(cè)定意義: 細(xì)胞色素P450酶是一組主要存在于肝臟的同工酶,在外源物質(zhì)代謝中具有重要作用,尤其是藥物和毒物的代謝。AH在P450酶系中相當(dāng)于CYP2E1亞型,CYP2E1不僅參與了藥物的代謝,而且還能催化多種前致癌物和前毒物的活化過(guò)程。 測(cè)定原理: AH催化苯胺羥化后產(chǎn)生的4-氨基酚,進(jìn)一步轉(zhuǎn)變?yōu)榉?吲哚復(fù)合物,在630nm處有特征吸收峰;通過(guò)測(cè)定630nm吸光度增加速率,來(lái)計(jì)算AH活性。 自備儀器及用品: 普通離心機(jī)、超速離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、雙蒸水和冰。 |
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
同源盒蛋白HOXB13抗體薄黑孔菌大鼠水通道蛋白0elisa檢測(cè)試劑盒
磷suan化3磷suan肌依賴(lài)性蛋白激酶1抗體釀酒酵母大鼠胃動(dòng)suelisa檢測(cè)試劑盒
磷suan化P63腫瘤抑制基因抗體釀酒酵母大鼠維生suB6elisa檢測(cè)試劑盒
磷suan化p21激活激酶4抗體平菇大鼠超敏C反應(yīng)蛋白elisa檢測(cè)試劑盒
磷suan化P73腫瘤抑制基因抗體繩狀青霉大鼠透明質(zhì)suanelisa檢測(cè)試劑盒
磷suan化DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體淺黃隱球酵母大鼠胰蛋白meielisa檢測(cè)試劑盒
p53正向凋亡調(diào)控因子抗體居真菌細(xì)菌小鼠破骨分化因子elisa檢測(cè)試劑盒
磷脂酶C1樣蛋白抗體燼灰產(chǎn)色鏈霉菌小鼠C反應(yīng)蛋白elisa檢測(cè)試劑盒
前列腺癌和結(jié)腸癌相關(guān)蛋白叢毛單胞菌小鼠免疫球蛋白Aelisa檢測(cè)試劑盒
重組蛋白G抗體中國(guó)臺(tái)灣根霉小鼠白介su1βelisa檢測(cè)試劑盒
磷脂酰肌激酶催化亞單位A抗體密歇根棍狀桿菌標(biāo)記亞種大鼠補(bǔ)體蛋白4elisa檢測(cè)試劑盒
蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶抗體大腸埃希菌大鼠維生suD3elisa檢測(cè)試劑盒
足特異蛋白抗體板栗蛇孢日規(guī)殼大鼠雌二受體elisa檢測(cè)試劑盒
腫瘤抑制基因抗體(野生型P53)間型假絲酵母大鼠抗Ⅲ抗體elisa檢測(cè)試劑盒
配對(duì)盒基因7抗體擴(kuò)展青霉改名婁地青霉小鼠肝脂酶elisa檢測(cè)試劑盒
苯胺4羥化酶(AH)測(cè)試盒微量法3-羥基-3-甲基戊二酰fu酶A合酶1(HMGCS1)試劑盒 Anti-STK11 AntibodyPE標(biāo)記的小鼠抗人IgM
胱天蛋白mei7(P7)試劑盒 Anti-STRA8 Antibody羅丹明標(biāo)記的小鼠抗羊IgG
蛋白17(Sp17)試劑盒Anti-STUB1 Antibody膠體金標(biāo)記的小鼠抗羊IgG
補(bǔ)體因子B(CFB)試劑盒 Anti-STRA8 Antibody性磷suan酶(AP)標(biāo)記的小鼠抗羊IgG
乳suan脫氫酶A(LDHA)試劑盒 Anti-STMN1 Antibody(PB0596)生物su標(biāo)記的小鼠抗羊IgG
α-血紅蛋白穩(wěn)定蛋白(αHSP)試劑盒 Anti-STS AntibodyAlexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗羊IgG
死亡相關(guān)蛋白6(DAP6)試劑盒Anti-STRAP Antibody(PB0476)PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗羊IgG