優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
細(xì)胞色素b5含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法 | 可見(jiàn)分光光度法 | 50管/48樣 | BJ-01611266-2 |
商品介紹:
測(cè)定意義 細(xì)胞色素P450酶是一組主要存在于肝臟的同工酶,藥物在動(dòng)物體內(nèi)的I相反應(yīng)主要依賴細(xì)胞色素P450酶催化完成,許多藥物能誘導(dǎo)或抑制細(xì)胞色素P450的活性,從而引起藥物的療效降低、中毒和殘留發(fā)生率的增加。細(xì)胞色素P450和細(xì)胞色素b5是P450酶系的兩個(gè)血紅素蛋白,其比值的變化與P450代謝活性密切相關(guān)。 測(cè)定原理: 氧化型細(xì)胞色素b5經(jīng)連二亞硫酸鈉還原后,在424nm處有最大吸收峰,且在424nm-490nm的消光系數(shù)為171n/M•cm,通過(guò)測(cè)定424nm和490nm處吸光值的差異,即可計(jì)算出細(xì)胞色素b5的含量 實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備: 可見(jiàn)分光光度計(jì)、普通離心機(jī),低溫超速離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水和甘油。 |
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無(wú)需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來(lái)的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒(méi)有顏色,如果設(shè)置了使用說(shuō)明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
早期發(fā)育調(diào)控蛋白2抗體黃白側(cè)耳大鼠淋巴趨化因子elisa檢測(cè)試劑盒
磷酯酶Cβ3釀酒酵母大鼠心肌營(yíng)養(yǎng)su1elisa檢測(cè)試劑盒
血小板源性生長(zhǎng)因子A抗體克魯弗酵母大鼠P物質(zhì)elisa檢測(cè)試劑盒
特異性核苷suan果糖β抗體污黑腐皮殼大鼠周期suD1elisa檢測(cè)試劑盒
11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框73抗體蠟樣芽孢桿菌大鼠高遷移率族蛋白1elisa檢測(cè)試劑盒
磷suan乙轉(zhuǎn)移酶A抗體類諾卡氏菌屬大鼠血清總補(bǔ)體elisa檢測(cè)試劑盒
前列環(huán)su受體抗體多粘類芽胞桿菌大鼠脫氫表雄酮硫suan酯elisa檢測(cè)試劑盒
原鈣粘蛋白7抗體釀酒酵母小鼠基質(zhì)金屬蛋白mei4elisa檢測(cè)試劑盒
過(guò)氧化物酶膜蛋白1抗體大腸埃希菌小鼠Ⅰ型膠原elisa檢測(cè)試劑盒
橋粒斑菲su蛋白2抗體釀酒酵母大鼠低氧誘導(dǎo)因子1αelisa檢測(cè)試劑盒
胞粘蛋白結(jié)合調(diào)節(jié)蛋白抗體鏈格孢屬大鼠抗內(nèi)膜抗體elisa檢測(cè)試劑盒
絲ansuan/蘇ansuan蛋白激酶PCTK2抗體傳染性支氣管炎病大鼠遲現(xiàn)抗原elisa檢測(cè)試劑盒
磷suan二酯酶7抗體大腸埃希菌大鼠皮質(zhì)elisa檢測(cè)試劑盒
磷suan二酯酶7B抗體中華泰勒蟲(chóng)(甘肅臨洮株-2)大鼠肌球蛋白elisa檢測(cè)試劑盒
先天性眼外肌纖維化相關(guān)蛋白FEOM2抗體羅斯酵母小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷elisa檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞色素b5含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法畸胎瘤衍生生長(zhǎng)因子1(TDGF1)試劑盒Anti-TACR1 AntibodyCy5.5標(biāo)記的小鼠抗IgM
蛋白激酶C-ζ(PKCζ)試劑盒Anti-TAF12 AntibodyCy7標(biāo)記的小鼠抗IgM
外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶2(ERK2)試劑盒Anti-TAGLN AntibodyPE標(biāo)記的小鼠抗IgM
核孔蛋白205kda(NUP205)試劑盒Anti-Talin 1/TLN1 AntibodyAPC標(biāo)記的小鼠抗IgM
蛋白磷suan酶(PP)試劑盒Anti-TAL1 AntibodyAlexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗IgM
胰島su自身(IAA)試劑盒Anti-TANK AntibodyCy3標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG
轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(TNPO2)試劑盒Anti-TAP2 AntibodyCy5標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG