商品介紹:
測定意義: 花色苷是一類易溶于極性溶劑的天然色素,屬黃酮類化合物?;ㄉ諒V泛存在于植物的根、莖、葉、花和果實中,使其呈現(xiàn)由紅到紫等不同顏色,是植物主要的呈色物質(zhì)。 類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UDP-glycose flavonoid glycosyltransferase, UFGT)是花色苷合成過程的最后一個酶,可以把不穩(wěn)定的花色素催化成花色苷,在一定范圍內(nèi),UFGT活性與花色素苷的合成呈現(xiàn)正相關(guān)。 測定原理: UFGT催化UDPG與槲皮素生成UDP;UDP在丙酮酸激酶與乳酸脫氫酶作用下,氧化NADH為NAD+,NAD+生成速度與UDP含量成正比,通過340nm吸光度下降速度反映UFGT活性。 需自備的儀器和用品: 酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔酶標(biāo)板、研缽、冰和蒸餾水。 |
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UFGT)測試盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | BJ-0161184-1 |
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項:
待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復(fù)凍融會導(dǎo)致SOD部分失活。
一個試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
PE-Cy3標(biāo)記的羊抗人IgM定10097-84-4
PE-CY5標(biāo)記的羊抗人IgM爪哇根霉氨基葡萄糖硫酸鹽29031-19-4
APC標(biāo)記的羊抗人IgM枯草芽孢桿菌氧化白藜蘆29700-22-9
Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗人IgM陳華癸氏中間根瘤菌異胡薄荷7786-67-6
Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗人IgM季也蒙有孢漢遜酵母人參皂甙52705-93-8規(guī)格
Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗人IgM構(gòu)巢曲霉betulinaldehyde13159-28-9
Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗人IgM草木樨中華根瘤菌鹽酸育亨賓65-19-0
PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗人IgM雅致小克銀漢霉caffeic酸331-39-5規(guī)格
PE-Cy7標(biāo)記的羊抗人IgM分枝卷霉木蘭脂su31008-18-1
Cy3標(biāo)記的羊抗人IgM大腸埃希氏桿菌velutin25739-41-7
性磷酸酶(AP)標(biāo)記的羊抗人IgM釀酒酵母番瀉苷C37271-16-2
辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗人IgM灰樹花83-49-8
辣根過氧化物酶標(biāo)記的小鼠抗人IgG東方伊薩酵母linderalactone728-61-0
性磷酸酶(AP)標(biāo)記的小鼠抗人IgG短柄帚霉acetylcorynoline18797-80-3
羅丹明標(biāo)記的小鼠抗人IgG薄蓋靈芝赤蘚糖149-32-6
類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UFGT)測試盒微量法調(diào)節(jié)正常T表達(dá)和因子(RANTES)試劑盒 Anti-HDAC4 Antibody微管蛋白γ/Tubulin γ
Bcl2同源拮抗劑1(BAK1)試劑盒Anti-HDAC5 Antibody血管生成su受體1
肝臟糖原磷酸化酶(PYGL)試劑盒Anti-HDAC5 Antibody磷酸化微管相關(guān)蛋白
唾液酸乙酰酯酶(SIAE)試劑盒Anti-HDAC5 AntibodyG蛋白偶聯(lián)受體TAS1R3
脂質(zhì)運(yùn)載蛋白1(LCN1)試劑盒Anti-HDAC6 Antibody端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶
促卵泡su(FSH)試劑盒 Anti-HDAC6 AntibodyDNA拓普西異構(gòu)酶Ⅱ
外基質(zhì)磷酸糖蛋白(MEPE)試劑盒 Anti-HDAC7 AntibodyT7 tag標(biāo)簽