細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
人支氣管成纖維細(xì)胞價格 | T25m2 | CS-963714 |
人支氣管成纖維細(xì)胞【Human Lung: Bronchial Fibroblast Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細(xì)胞密度,細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
Humanai-filaggrinaibody,AFAELISA試劑盒人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 石吊蘭甲素 HPLC≥98% 20mg
Humanai-gangliosideaibody,GM1ELISA試劑盒人抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體(GM1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 石斛酚 HPLC≥95% 20mg
Humanai-gasicparietalcellaibody,AGPA/PCAELISA試劑盒人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 石斛堿 HPLC≥98% 20mg
Humanai-gasicparietalcellaibody,AGPA/PCAELISA試劑盒人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 石榴皮鞣素 HPLC≥98% 10mg
Humanai-hepatitisDvirusaibody,ai-HDVELISA試劑盒人抗丁型肝炎病毒抗體(ai-HDV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 石杉堿甲 HPLC≥98% 20mg
Humanai-Histoneaibody,AHA 人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 石杉堿乙 HPLC≥92% 20mg
Humanai-Histoneaibody,AHAELISA試劑盒人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 石松靈堿 HPLC≥98% 20mg
Humanai-IgAaibody 人抗IgA抗體(ai-IgA-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 石蒜堿 HPLC≥98% 20mg
Humanai-IgAaibodyELISA試劑盒人抗IgA抗體(ai-IgA-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 石蒜裂堿 HPLC≥98% 20mg
Humanai-immunodeficiencyvirusaibody,HIV 人抗人類缺陷病毒抗體(HIV)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 矢車菊素O葡萄糖苷 HPLC≥98% 5mg
英文名稱HumanMacrophageMigRationInhibitoryFactorELISAKit人巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 甲氧基鐵屎米酮 HPLC≥95% 20mg
成分比色法定量檢測試劑盒20 樺褐孔菌醇 HPLC≥95% 20mg
Ratp53/tumorprotein,p53/TP53ELISA試劑盒大鼠P53(P53)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T ,二羥基色原酮 蕓香糖苷 HPLC≥95% 20mg
小鼠無孢蛋白(ASPN)ELISA試劑盒 ,英文名: ASPN ELISA Kit 脫氫姜酮 HPLC≥95% 20mg
兔子高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA檢測試劑盒RabbitHighmobilitygroupprotein1,HMG-1ELISAKit 96T/48T 二乙酰氧基姜二醇 HPLC≥95% 20mg
牛纖連蛋白(FN)試劑盒 Bovine Fibronectin,FN ELISA Kit 丁酰鯨魚醇 HPLC≥95% 20mg
英文名稱HumanMIP-5ELISAKit人巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-5(MIP-5)規(guī)格:96T/48T alpha香樹精; alpha香樹脂醇 HPLC≥95% 20mg
電擊法酵母細(xì)胞轉(zhuǎn)化試劑盒20 葫蘆二烯醇 HPLC≥95% 20mg
RatParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISA試劑盒大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T ,二羥基升麻醇 HPLC≥95% 20mg
小鼠吻素受體(KISS1R)ELISA試劑盒 ,英文名: KISS1R ELISA Kit 檸檬黃素 HPLC≥95% 20mg
人支氣管成纖維細(xì)胞價格RatFolicacid,FAELISAKit大鼠葉酸(FA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 十一酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Undecanoic acid 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC)
RatFolicacid,FAELISA試劑盒大鼠葉酸(FA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 十一酸(Standard for GC,≥99.0%(GC)) Undecanoic acid 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.0%(GC)
ratfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 十二苯醚 Pentabromophenyl ether 質(zhì)量規(guī)格:>98%
ratfollicle-stimulatinghormone,FSHELISA試劑盒大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 十五烷酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)) Pentadecanoic Acid 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)
RatFollistatin,FSELISAKit大鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 十五氟辛酸,高等級[離子對色譜級] IPC-PFFA-8 HG 質(zhì)量規(guī)格:用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對試劑
RatFollistatin,FSELISA試劑盒大鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 十五氟辛酸(約5mmol)[離子對色譜級] IPC-PFFA-8 (ca. 5mmol) 質(zhì)量規(guī)格:用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對試劑
RatFractalkine/CX3CL1ELISAKit大鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 十烷基基氯化銨 Decyltrimethylammonium chloride 質(zhì)量規(guī)格:>99%
RatFractalkine/CX3CL1ELISA試劑盒大鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 十四烷(標(biāo)準(zhǔn)品) Tetradecane 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)
Ratfreechorionicgonadoopin,f-βCGELISAKit大鼠游離β絨毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 十四烷(Standard for GC,>99%(GC)) Tetradecane 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,>99%(GC)
Ratfreechorionicgonadoopin,f-βCGELISA試劑盒大鼠游離β絨毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 十四醇(Standard for GC, ≥99.5% (GC)) 1-Tetradecanol 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC, ≥99.5% (GC)
我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。