Caspase-3抑制劑 Ac-DEVD-CHO200ul使用說(shuō)明書(shū)使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
產(chǎn)品名稱：Caspase-3抑制劑 Ac-DEVD-CHO200ul使用說(shuō)明書(shū)
儲(chǔ)存條件：-20℃保存。
有效期：一年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
Ac-DEVD-CHO是一種高效可逆的caspase-3的小分子抑制劑，Ki值分別是0.23?？梢砸种朴?/span>Caspase3激活導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡。Ac-DEVD-CHO分子式為N-Acetyl-Asp-Glu-Val-Asp-CHO，即C20H30N4O11，分子量為502.5。也可以抑制Caspase7。
Ac-DEVD-CHO 采用進(jìn)口高品質(zhì)原料分裝配制。濃度為10mM。本產(chǎn)品適用于需要用到Ac-DEVD-CHO 的各種實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行配制和使用，具體請(qǐng)參考相關(guān)文獻(xiàn)或?qū)嶒?yàn)指南。
Caspase-3抑制劑 Ac-DEVD-CHO200ul使用說(shuō)明書(shū)操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
Caspase-3抑制劑 Ac-DEVD-CHO200ul使用說(shuō)明書(shū)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
小葉藤黃Garcinia cowa Nigrolineaxanthone V 7,12-二羥基-9-甲氧基-2,2-二甲基-10-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-2H,6H-并[3,2-B]氧雜 864516-31-4 C24H24O6 ≥90%
植醋內(nèi)wo7iumphytctq14306-2-325mg
米仔蘭Aglaia odorata 5,7,4'-Tri-O-metxylaromad none 76792-94-4 C18H18O6 單元素錳溶液成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)080600
檢查用錄氮平100323-200201常溫，避光100mg
非諾多泮相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品20mg
10043-35-3 硼酸標(biāo)準(zhǔn)品 1g
表告依春Epigoitrin107-93-120mg
Cephalocyclidin A CEPHALOCYCLIDIN A 421583-14-4
*有關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品27387-31-1 30mg*有關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品
*B;cucurbitacin B 6199-67-3 20mg 訂購(gòu)|咨詢
嬰粟殼 Opium poppy shell 1g
紫蘇子隊(duì)照藥材Perillacontrolmedicine1g
Luteolin 木犀草素 491-70-3
Tartaric Acid 標(biāo)準(zhǔn)品87-69-4 1g標(biāo)準(zhǔn)品
鹽酸益母草堿;Leonurine hyd 24697-74-3 20mg 訂購(gòu)|咨詢
11（R）-HEDE （100 ug） 11R-xy7noxy-12E，14Z-eicosadienoic acid； 11（R）-HEDE
Hexanoyl Glycine （100 mg） NSC 224460； N-1-oxohexyl-glycine
iFluor 750-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml iFluor 750-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Myristoyl Ethanolamide （100 mg） N-（2-xy7noxyetxyl）-tetradec*； AM 3165|Comperlan MM|Schercomid MME； Myristoyl Ethanolamide
11（Z），14（Z），17（Z）-Eicosatrienoic Acid （100 mg） 11Z，14Z，17Z-eicosatrienoic acid； 11（Z），14（Z），17（Z）-Eicosatrienoic Acid
（3S， Ryanodine
gp100 (457-466)Leu-Leu-Asp-Gly-Thr-Ala-Thr-Leu-Arg-Leu
α-Conotoxin GSAla-Cys-Ser-Gly-Arg-Gly-Ser-Arg-Cys-Hyp-Hyp-Gln-Cys-Cys-Met-Gly-Leu-Arg-Cys-Gly-Arg-Gly-Asn-Pro-Gln-Lys-Cys-Ile-Gly-Ala-His-Gla-Asp-Val
[Met5,Arg6,Phe7] EnkephalinTyr-Gly-Gly-Phe-Met-Arg-Phe
Biotin-LC-KemptideBiotin-LC-Leu-Arg-Arg-Ala-Ser-Leu-Gly
p3K, (Lys 58 Lys 60 Lys 63) Ea(52–68)Ala-Ser-Phe-Glu-Ala-Gln-Lys-Ala-Lys-Ala-Asn-Lys-Ala-Val-Asp-Lys-Ala
Caspase-3抑制劑 Ac-DEVD-CHO200ul使用說(shuō)明書(shū)二乙胺DietxylamineCP500mL
CA1341B-100*1g瓊脂糖9012-36-6100*1g0
A5253-25GAlbumin Egg 卵清蛋白(雞)9006-59-125g
環(huán)境水樣DNA提取試劑盒50T
L-Asparagine, Anxy7nous100g
