CCCP (50 mM) 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑100ul售后服務(wù)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
CCCP (50 mM) 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑100ul售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
CCCP (50 mM) 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑100ul售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
Bcap-37(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0101Hela(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SELE Others Mouse 小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
WI-38細(xì)胞,*系 人EBV陽性B淋巴瘤細(xì)胞,P3HR1細(xì)胞 615小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤瘤株;DCS
家貓肺細(xì)胞;FCA-L1
CTSL1 Others Human 人 CTSL1 / Cathepsin-L1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人支氣管上皮細(xì)胞cDNAHBEpiC cDNA
IL1R1 Others Rat 大鼠 IL1R1 / CD121a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
3T3A31 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
CL-0238U-87 MG(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元
表達(dá)SV40T和EBNA1的人胚腎細(xì)胞;293ET 人腎上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
HDAC3 Others Human 人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基SMCM-sf-prf
轉(zhuǎn)化細(xì)胞
P3X63Ag8細(xì)胞,骨髓瘤細(xì)胞 人十二指腸腺癌細(xì)胞,HuTu-80細(xì)胞 CM-H029人臍帶單核細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1)
FCGR4 Others Mouse 小鼠 CD16-2 / FCGR4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
鵝雌激素(E)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血吸蟲抗體(IgG)免疫試劑盒 Human schistosoma haematobium antibody IgG ELISA kit
人抗膠原蛋白抗體(CLA)ELISA試劑盒 ,英文名: CLA ELISA Kit
RatInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISA試劑盒大鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanFructose-1,6-bisphosphatealdolase,FDAELISA試劑盒人果糖1,6二磷酸醛縮酶(FDA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit人β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit 大鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒
humanProstaglandinE1,PG-E1ELISAKit 人前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humananti-parotidductantibodyELISA試劑盒人抗腮腺管抗體(anti-parotidductAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細(xì)胞壁束縛酸性蔗糖轉(zhuǎn)化酶(acidinvertase)活性比色法定量檢測試劑盒(胞壁)20次
Humantyrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains1,Tie1ELISAKit人血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域*激酶1(Tie1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
CCCP (50 mM) 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑100ul售后服務(wù)小鼠膀胱抗原(BTA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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小鼠半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝