破膜劑100ml免費代測GBC-SD(人膽囊癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CM-H042人肝內(nèi)膽管上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人細胞裂解液 (陽性對照)
HCT116細胞,人結直腸癌細胞 人黑色素瘤細胞,HME1細胞 人胚肺二倍體細胞;KMB-17
人整合SV40基因的上皮細胞;HBL-100 [HBL100]
BACE1 Others Mouse 小鼠 BACE-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
破膜劑100ml免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
破膜劑100ml免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
破膜劑100ml免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化);PC-12(高分化)
IL10RB Others Mouse 小鼠 IL10RB / IL10R2 人細胞裂解液 (陽性對照)
KYSE450 食管癌
RL95-2人子宮內(nèi)膜癌細胞 Human endometrial carcinoma cells RL95-2 D-MEM/F-12培養(yǎng)基+10%FBS
HGF Protein Mouse 重組小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 (His 標簽)
小小神經(jīng)膠質(zhì)細胞(MM)(5×105) RBE, 人肝膽管癌細胞 Human
VEGFA Others Human 人 / 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 人細胞裂解液 (陽性對照)
人膀胱基質(zhì)成纖維細胞裂解物HBdSFL
人神經(jīng)元細胞*培養(yǎng)基 100mL
NRK-49F細胞,大鼠腎成纖微細胞 RT4(膀胱癌細胞) 豹貓肺成纖維樣細胞;LCL3
EFNA3 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His 標簽)
C918(人眼脈絡黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 原代神經(jīng)膠質(zhì)細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml
大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3(TRAIL-R3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管生成素2(ANG-2)免疫試劑盒 Human Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit
人抗鈣調(diào)素特異抗體(CAM-ab)ELISA試劑盒 ,英文名: CAM-ab ELISA Kit
RatInterleukin2,IL-2ELISA試劑盒大鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanGlucosetransporter1,GLUT1ELISA試劑盒人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(GLUT1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterleukin-2receptor,IL-2RELISAKit人白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human mitogen activated protein kinase /MAP kinase (MAPK) ELISA Kit 人原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)ELISA試劑盒
Humanβ-subunitsofhemoglobin,HB-βELISAKit 人血紅蛋白β亞基(HB-β)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanAprotinin,APELISA試劑盒人*(AP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物乙醇脫氫酶總活性(NDMA)比色法定量檢測試劑盒20次
Humantissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
破膜劑100ml免費代測兔子促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子促黃體激素(LH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子雌二醇(E2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝