細(xì)胞骨架染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法Hacat(人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
CM-H017人上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
GFRA1 Others Rat 大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
Loo細(xì)胞,人結(jié)腸癌細(xì)胞 人黑色素瘤細(xì)胞,HS-6細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞(拉祜族);KM9406
人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RA
CD80 Others Human 人 B7-1 / CD80 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
細(xì)胞骨架染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
細(xì)胞骨架染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細(xì)胞骨架染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
平滑肌細(xì)胞生長添加物SMCGS
IGSF8 Others Human 人 PGRL / IGSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0906
CNE2細(xì)胞,人鼻咽癌細(xì)胞(低分化) 小鼠骨髓瘤細(xì)胞,P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]細(xì)胞 蚊源細(xì)胞
NCI-H1650(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-24305 Melanocyte Growth Medium M2 (prf), 黑色素細(xì)胞生長培養(yǎng)基M2型套裝,無酚紅 500ml
LY86 Others Human 人 LY86 / MD-16 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人膀胱上皮永生化細(xì)胞;SV-HUC-1
人臍血間質(zhì)干細(xì)胞 Human umbilical cord blood mesenchymal stem cells
HOS細(xì)胞,人骨肉瘤細(xì)胞 皺褶青霉 人胚肺細(xì)胞系;KuMA
TE-10(人食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HMy2.CIR(人B淋巴母細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞 人皮膚成纖維細(xì)胞;HSAS4
大鼠甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒 ,英文名: AFP ELISA Kit
人血管生長素(ANG)ELISA檢測試劑盒HumanAngiogenin,ANGELISAKit 96T/48T
豬戊型肝炎病毒(HEV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
MVIgM麻疹病毒IgM(間接法二步法)
體液超氧化物陰離子化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitCXCR3人CXC趨化因子受體3規(guī)格:48T/96T
小鼠對基苯(PABA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human acidic fibroblast growth factor 1 (aFGF-1) ELISA Kit 人酸性成纖維細(xì)胞生長因子1(aFGF-1)ELISA試劑盒
Humanplaet-associatedComplement3,PAC3ELISAKit 人血小板相關(guān)補(bǔ)體3(PAC3)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAquaporin4,AQP-4ELISA試劑盒人水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物異檸檬酸脫氫酶(isocitratedehydrogenase;IDH)電泳分析試劑盒5次
Humanthyroxine,T4ELISAKit人甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細(xì)胞骨架染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法兔子D二聚體(D2D)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝