鞭毛染色試劑盒50ml使用說明書使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
鞭毛染色試劑盒50ml使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
鞭毛染色試劑盒50ml使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
H4-IIE(大鼠肝癌細(xì)胞 ) 5×106cells/瓶×2
CM-H018人成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
IL7R Others Rat 大鼠 IL7R / IL7RA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
HT-29細(xì)胞,人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 人黑色素瘤細(xì)胞,HME7細(xì)胞 SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;PUMC-HUVEC-T1
人胚肺二倍體細(xì)胞;HEL-2
CD86 Others Human 人 CD86 / B7-2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CM-M125小鼠牙細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
IGSF8 Others Mouse 小鼠 PGRL / IGSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
P19小鼠畸胎瘤細(xì)胞 P19 mouse teratoma cells a-MEM(肌醇 43.2mg/l,* 8.82mg/l)+7.5%BCS+2.5%FBS
IL12A Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
SW 1990(人胰腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 NCL-H460(非小細(xì)胞肺癌)
SDF2 Others Mouse 小鼠 SDF2 / SDF-2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人膀胱平滑肌細(xì)胞裂解物HBdSMCL
小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Fox-NY
SK-OV-3細(xì)胞,卵巢癌細(xì)胞 人胃癌細(xì)胞系,HS-746T細(xì)胞 豹貓肌肉成纖維樣細(xì)胞;LCM4
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);F9-CAG-tTA-4D6
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠甲羥戊酸5-焦磷酸脫羧酶(MDD)ELISA試劑盒 ,英文名: MDD ELISA Kit
人血管生成素1(ANG-1)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit 96T/48T
豬戊型肝炎病毒(HEV)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法) 48T
MVIgG麻疹病毒IgG(間接法二步法)
體液超氧化物陰離子熒光法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitCXCR1人CXC趨化因子受體1規(guī)格:48T/96T
小鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat visceral adipose specific serine protease inhibitor (vaspin) ELISA Kit 大鼠內(nèi)臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒
Humanvasopeptidaseinhibitors,VPIELISAKit 人血管活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAquaporin2,AQP-2ELISA試劑盒人水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物乙酰輔酶A*乙酰轉(zhuǎn)移酶(ACAT)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次
HumanTissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISAKit人組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鞭毛染色試劑盒50ml使用說明書兔子白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝