我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規(guī)范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
小鼠腎小球內皮細胞說明 | T25m2 | CS-963811 |
小鼠腎小球內皮細胞【Mouse Glomerular :Normal Glomerular Endothelial Cells】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)VIP人血管活性腸肽規(guī)格:48T/96T 七葉皂苷 Purity≥98% 20mg
VK1人維生素K1規(guī)格:48T/96T 七葉皂苷A HPLC≥98% 10mg
VPI人血管活性肽酶抑制劑規(guī)格:48T/96T 七葉皂苷B HPLC≥98% 10mg
VWF人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子規(guī)格:48T/96T 七葉皂苷C HPLC≥95% 10mg
y-Ⅱ人胰蛋白酶原Ⅱ規(guī)格:48T/96T 七葉皂苷D HPLC≥95% 10mg
ypsin人胰蛋白酶規(guī)格:48T/96T 七葉皂苷Iia HPLC≥98% 10mg
親環(huán)蛋白人肽酰脯氨酰異構酶規(guī)格:48T/96T 七葉皂苷IIb HPLC≥98% 10mg
ELISAKi人神經降壓素規(guī)格:48T/96T 七葉皂苷鈉 Purity≥98% 20mg
ELISA分析20樣本 榿木酮 HPLC≥98% 20mg
ELISA*制備試劑盒10 漆黃素 HPLC≥98% 20mg
小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA檢測試劑盒MousePlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISAkit 96T/48T 西立伐他汀鈉 Cerivastatin 質量規(guī)格:BR
人谷氨酸谷草轉氨酶2,線粒體(谷草轉氨酶2)(GOT2)試劑盒 Human GOT2 ELISA Kit 西替利嗪 Cetirizine 2HCl 質量規(guī)格:>98%,進口分裝
RatGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptide,GIPELISAKit大鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 醋酸西曲瑞克 Cetrorelix Acetate 質量規(guī)格:>98%,BR
Arf6鳥苷酸酶活性分析試劑盒6 白屈菜紅堿 Chelerythrine 質量規(guī)格:>98%,分析標準品
MouseHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISA試劑盒小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 醋酸氯己定 Chlorhexidine Acatate 質量規(guī)格:>98%
小鼠酸性β葡萄糖苷酶(GBA)ELISA試劑盒 ,英文名: GBA ELISA Kit 氟伐他汀鈉 Fluvastatin salt 質量規(guī)格:>99%,BR
小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA檢測試劑盒MouseP-SelectinELISAkit 96T/48T 氟伐他汀鈉(標準品) Fluvastatin salt 質量規(guī)格:>99%,BR
人谷氨酸-半胱氨酸連接酶調節(jié)亞基(GCLM)試劑盒 Human GCLM ELISA Kit 克林沙星 Clinafloxacin 質量規(guī)格:>98.5%
Ratglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鹽酸左旋咪唑 Levamisole HCl 質量規(guī)格:>98%,BR
ATP酶法冰凍切片動物肌肉組織分型染色試劑盒20 鹽酸左旋咪唑(標準品) Levamisole HCl 質量規(guī)格:UV法含量測定
小鼠腎小球內皮細胞說明*化學封閉溶液10毫升 葡聚糖凝膠G-50;交聯葡聚糖G-50(中顆粒) Sephadex G-50 質量規(guī)格:分類范圍3×100000
超聲化鮭魚精單鏈DNA10毫升 葡聚糖凝膠G-50;交聯葡聚糖G-50(粗顆粒) Sephadex G-50 質量規(guī)格:分類范圍3×100000
超氧化物歧化酶(SOD)標準曲線測定試劑盒5 葡聚糖T 1g
超氧化物歧化酶(SOD)標準曲線測定試劑盒5 葡聚糖D70/右旋糖苷 Dextran D70 質量規(guī)格:Mw:63000~77000,USP32
超氧化物歧化酶(SOD)紅細胞裂解樣品制備試劑盒50 葡聚糖D20/右旋糖苷 Dextran D20 質量規(guī)格:MW:16000~24000
超氧化物歧化酶(SOD)紅細胞裂解樣品制備試劑盒50 撲熱息痛/對乙酰氨基酚 Paracetamol(Acetaminofen polvo) 質量規(guī)格:>98.5%,BR
超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑盒(附標準樣)50 撲熱息痛(標準品) Paracetamol(Acetaminofen polvo) 質量規(guī)格:HPLC>99%,標準品
超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑盒50 撲滅津(標準品) Propazine 質量規(guī)格:分析標準品
超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑盒50 撲米酮(標準品) Primidone 質量規(guī)格:檢查
超氧化物歧化酶(SOD)活性酶動力比色法定量檢測試劑盒(含標準樣)50 撲草凈 Prometryn 質量規(guī)格:>95%,BR
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。