細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
小鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞直銷(xiāo) | T25m2 | CS-963849 |
小鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞【Mouse Eye:Normal Trabecular Meshwork Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說(shuō)明書(shū)僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度,細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請(qǐng)及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
小鼠花生四烯酸5脂氧合酶(Alox5)ELISA試劑盒 ,英文名: Alox5 ELISA Kit 牡荊素(標(biāo)準(zhǔn)品) Vitexin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠踝蛋白(TLN)ELISA試劑盒 ,英文名: TLN ELISA Kit 牡荊素葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Glucosyl-vitexin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠壞死因子α(TNF-α)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseTumornecrosisfactorα,TNF-α 96T/48T 牡荊素鼠李糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品) vitexin-2″-o-rhamnoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠壞死因子α(TNFα)ELISA試劑盒 ,英文名: TNFα ELISA Kit 木蝴蝶苷B(標(biāo)準(zhǔn)品) Oroxin B 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 ,英文名: TNF-α ELISA Kit 磷霉素氨丁三醇 Fosfomycin tromethamine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠壞死因子β(TNF-β)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseTumornecrosisfactorβ,TNF-β 96T/48T 磷霉素氨丁三醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Fosfomycin tromethamine 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
小鼠壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒 ,英文名: TNF-β ELISA Kit 木犀草苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Cynaroside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-Ⅰ 96T/48T 木香烴內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Costundide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒 ,英文名: TNFsR-Ⅰ ELISA Kit 擬人參皂苷F11(標(biāo)準(zhǔn)品) Pseudoginsenoside F11 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-Ⅱ 96T/48T 擬人參皂苷RT5(標(biāo)準(zhǔn)品) Pseudoginsenoside RT5 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
BMGY培養(yǎng)基100/500毫升 噻托銨 Tiotropium bromide anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR,無(wú)水物
MouseIerleukin1β,IL-1βELISA試劑盒小鼠白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 富馬酸福莫特羅 (二水) Formoterol fumarate 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,二水合物
小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒 ,英文名: -3 ELISA Kit 富馬酸福莫特羅(無(wú)水) Formoterol fumarate 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,無(wú)水,EP
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseVascularEndothelialcellGrowthFactorC,VEGF-CELISAkit 96T/48T 法羅培南(鈉)(2.5水) Faropenem 質(zhì)量規(guī)格:度>99.0%,BR
人肝細(xì)胞核因子1β(HNF-1B)試劑盒 Human HNF-1B ELISA Kit 法羅培南鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Faropenem 質(zhì)量規(guī)格:標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測(cè)定
RatHistamine,HISELISAKit大鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 奧利司他 Orlistat(synthesis) 質(zhì)量規(guī)格:≥98.0%,BR
BMMY培養(yǎng)基100/500毫升 利福霉素鈉;利福霉素SV鈉 Rifamycin salt 質(zhì)量規(guī)格:>900IU/mg ,BR
MouseIerleukin2,IL-2ELISA試劑盒小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 醋酸奧曲肽 Octreotide acetate 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
小鼠神經(jīng)型合成酶(nNOS/NOS1)ELISA試劑盒 ,英文名: nNOS/NOS1 ELISA Kit S(+)-2-氨基-1-丁醇 (S)-(+)-2-Amino-1-butanol 質(zhì)量規(guī)格:>99%,液態(tài),0.944 g/mL ,25℃
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseVascularEndothelialcellGrowthFactorB,VEGF-BELISAkit 96T/48T D-鞘氨醇 trans-D-erythro-sphingosine 質(zhì)量規(guī)格:度≥98%
小鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞直銷(xiāo)大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)ELISA檢測(cè)試劑盒RatsolubleToll-likereceptor2,sTLR-2ELISAKit 96T/48T 木蘭花堿 Magnoflorine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)試劑盒 Rat soluble Toll-like receptor 2,sTLR-2 ELISA Kit 木聚糖酶 Xylanase from Trichoderma viride 質(zhì)量規(guī)格:BR,6萬(wàn)U/G
大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)ELISA檢測(cè)試劑盒RatsolubleToll-likereceptor6,sTLR-6ELISAKit 96T/48T 木聚糖 XYLAN 質(zhì)量規(guī)格:>95%,來(lái)源于玉米芯,溶于水
大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)試劑盒 Rat soluble Toll-like receptor 6,sTLR-6 ELISA Kit 木蝴蝶苷B(標(biāo)準(zhǔn)品) Oroxin B 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠可溶性白介素-2 受體(sIL-2R)試劑盒 Rat soluble ierleukin-2 receptor,sIL-2R ELISA Kit 木蝴蝶苷B HPLC≥98% 20mg
大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA檢測(cè)試劑盒RatsolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit 96T/48T 木蝴蝶苷A HPLC≥98% 20mg
大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)試劑盒 Rat soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL ELISA Kit 木蝴蝶苷A HPLC≥98% 20mg
大鼠可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)試劑盒 Rat Soluble Lectin-like Oxidized Low Density Lipoprotein Receptor-1,sLOX-1 ELISA Kit 木瓜蛋白酶懸浮液 Papain 2x crystallized from papaya Latex 質(zhì)量規(guī)格:比活度:>20 U/mg,BC
大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA檢測(cè)試劑盒RatLeptinSolubleReceptor,sLRELISAKit 96T/48T 木瓜蛋白酶(800u/mg) Papain 質(zhì)量規(guī)格:800u/mg
大鼠可溶性瘦素受體(sLR)試劑盒 Rat Leptin Soluble Receptor,sLR ELISA Kit 木瓜蛋白酶(2000u/mg) Papain 質(zhì)量規(guī)格:2000u/mg;200萬(wàn)u/g
我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。