細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞價格 | T25m2 | CS-963870 |
大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞【Rat Airway: Normal Bronchial Smooth Muscle Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細(xì)胞密度,細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
Mousemyelinbasicprotein,MBPELISA試劑盒小鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 毛冬青皂苷B HPLC≥98% 20mg
Mousemyeloperoxidase,MPOELISA試劑盒小鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 毛冬青皂苷B HPLC≥98% 20mg
Mousemyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISA試劑盒小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 毛冬青皂苷B HPLC≥98% 20mg
MouseMyoglobin,MYO/MBELISA試劑盒小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T ’去去氫鬼臼 HPLC≥98% 20mg
MouseMyosin,MYSELISA試劑盒小鼠肌球蛋白(MYS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 菠菜甾醇OβD葡萄糖苷 HPLC≥98% 5mg
MouseN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISA試劑盒小鼠N-乙?;?/span>-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基巴戟醌 HPLC≥98% 20mg
MouseNeonatalThyroxine,NN-T4ELISA試劑盒小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 印烏堿 HPLC≥98% 20mg
MouseNervegrowthfactor,NGFELISA試劑盒小鼠神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 橘紅素 HPLC≥98% 20mg
Mouseneuophilelastase,NEELISA試劑盒小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 醋酸氯己定 HPLC≥98% 100mg
Mouseneuophilgelatinase-associatedlipocalin,NGALELISA試劑盒小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T α膽甾烷 HPLC≥98% 20mg
動物源性飼料羊源試劑盒20 蘇7B/溶劑紅19/脂肪紅7B Sudan Red 7B/Solvent Red 19 質(zhì)量規(guī)格:BS
RatVitaminK1,VK1ELISA試劑盒大鼠維生素K1(VK1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 蘇丹藍II/溶劑藍35 Sudan Blue II/Solvent Blue 35 質(zhì)量規(guī)格:BS
小鼠熱休克蛋白β2(HSPβ2)ELISA試劑盒 ,英文名: HSPβ2 ELISA Kit 紅 Methyl red 質(zhì)量規(guī)格:IND
豬血小板活化因子(PAF)ELISA檢測試劑盒Porcineplateletactivatingfactor,PAFELISAKit 96T/48T 間紅 m-Methyl red 質(zhì)量規(guī)格:IND
大鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)試劑盒 Rat ansforming growth factor α,TGF-α ELISA Kit 紅鈉鹽/酸性紅2 Methyl Red salt 質(zhì)量規(guī)格:IND
英文名稱HumanIerleukin-12(IL-12)ELISAKIT人白介素-12(IL-12)(P40)規(guī)格:96T/48T 西諾沙星;新惡酸 Cinoxacin 質(zhì)量規(guī)格:>99%,進分
動物源性飼料樣品處理試劑盒20 19-去甲-4-雄烯二酮 Norandrostenedione 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
RatvonWillebrandFactorcleavingprotease,ADAMTS-13/vWF-cpELISA試劑盒大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 達格列凈一水 ;達格列嗪水合物 Dapagliflozin propanediol hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%
小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 ,英文名: HSP-90 ELISA Kit 安塞曲匹/膽脂轉(zhuǎn)移蛋白阻滯劑 Anacetrapib;MK0859 質(zhì)量規(guī)格:>98%
小鼠組織因子(TF)ELISA檢測試劑盒MouseTissuefactor,IFELISAKit 96T/48T 達比加群酯 Dabigatran etexilate 質(zhì)量規(guī)格:>97%
大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞價格大鼠狀腺原氨酸(T3)試劑盒 Rat i-iodothyronine,T3 ELISA Kit 貓尾草異黃酮 HPLC≥98% 5mg
大鼠色氨酸5羥化酶2(TPH2)試劑盒 Rat yptophan 5-hydroxylase 2,TPH2 ELISA kit 莽草酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Shikimic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠色氨酸羥化酶(TPH)試劑盒 Rat yptophan Hydroxylase,TPH ELISA Kit 莽草酸 HPLC≥98% 20mg
大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA檢測試劑盒Ratpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit 96T/48T 莽草酸 Shikimic acid 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)試劑盒 Rat pigme epithelium-derived factor,PEDF ELISA Kit 芒果苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Mangiferin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠山梨醇脫氫酶(SDH)試劑盒 Rat sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA Kit 芒果苷 HPLC≥98% 20mg
大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA檢測試劑盒RatEpithelialneuophilactivatingpeptide78,ENA-78ELISAKit 96T/48T 芒果苷 Mangiferin 質(zhì)量規(guī)格:≥90%,BR
大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)試劑盒 Rat Epithelial neuophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA Kit 芒柄花黃素 HPLC≥98% 20mg
大鼠神經(jīng)降壓素(S)試劑盒 Rat neurotensin,S ELISA kit 蔓荊子黃素(標(biāo)準(zhǔn)品) Vitexicarpin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA檢測試劑盒Ratglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit 96T/48T 蔓荊子黃素 HPLC≥98% 20mg
我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。