大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞【Rat Brain : Normal Cerebral Vascular Endothelial Cells】 產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞價(jià)格 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號(hào) | CS-963910 |
收到凍存細(xì)胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
swinemajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/SLAⅠELISA試劑盒豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/SLAⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 硫酸長春堿 Vinblastine Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
swinemajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/SLAⅡ豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/SLAⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 硫酸長春堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Vinblastine Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
swinemajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/SLAⅡELISA試劑盒豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/SLAⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 硫酸長春堿(進(jìn)分) Vinblastine Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分Sigma V1377
swinemajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/SLAⅢ豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 替莫唑胺 Temozolomide 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
swinemajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/SLAⅢELISA試劑盒豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 替莫唑胺(標(biāo)準(zhǔn)品) Temozolomide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
SYBR綠染法細(xì)胞端粒酶活性AP電泳分析試劑盒10 氨魯米特 Aminoglutethimide 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP30,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
SYBR綠染法組織端粒酶活性AP電泳分析試劑盒10 氨魯米特(標(biāo)準(zhǔn)品) Aminoglutethimide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
SYBR綠色熒光核酸染色(20X)0.5毫升 氟他胺 Flutamide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP29
SYBR綠色熒光核酸染色試劑盒(配制25毫升/)10 氟他胺(標(biāo)準(zhǔn)品) Flutamide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
S腺苷同型半胱氨酸(SAH或AdoHcy)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20 環(huán)磷酰胺 Cyclophosphamide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,一水合物USP,BR
大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)試劑盒 Rat Iegrin αM,ITG/CD11b ELISA Kit 人參皂苷RH4 Ginsenoside RH4 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
英文名稱HumanCollageypeIIELISAKit人II型膠原(CollageypeII)ELISAKit規(guī)格:96T/48T 酸棗仁皂苷B1(標(biāo)準(zhǔn)品) Jujuboside B1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
動(dòng)物組織同還原酶1A(aldo-ketoreductase1A)活性比色法定量檢測試劑盒20 薯蕷皂苷A Prosapogenin A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
其它ELISA試劑盒 Rocilinostat (ACY-1215) ACY1215 質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性組蛋白脫乙酰酶(HDAC6)抑制劑
小鼠前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9(PCSK9)ELISA試劑盒 ,英文名: PCSK9 ELISA Kit 肉豆蔻酸,十四烷酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Myristic acid 質(zhì)量規(guī)格:GC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人維生素D3(VD3)ELISA檢測試劑盒HumanVitaminD3,VD3ELISAkit 96T/48T 肉豆蔻酸,十四烷酸 Myristic acid 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
大鼠整合素α2+β1(ITGA2+ITGB1)試劑盒 Rat iegrin alpha-2+beta-1,ITGA2+ITGB1 ELISA kit 丁二酮肟(鎳試劑) Dimethylglyoxime 質(zhì)量規(guī)格:AR
英文名稱HumanPIIINPELISAKit人III型前膠原肽(PIIINP)規(guī)格:96T/48T 黃酮 Flavone 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分
動(dòng)物組織同還原酶1B(aldo-ketoreductase1B)活性比色法定量檢測試劑盒20 依維菌素 Ivermectin 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
ELISAKiANKL兔核因子κB受體活化因子配基規(guī)格:48T/96T 細(xì)胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE) CFDA SE;Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester 質(zhì)量規(guī)格:≥90%,用于熒光標(biāo)記
大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞價(jià)格大鼠游離β絨毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA檢測試劑盒Ratfreechorionicgonadoopin,f-βCGELISAKIT 96T/48T 硫唑嘌呤 Azathioprine 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
大鼠游離β絨毛膜促性腺激素(f-βCG)試劑盒 Rat free chorionic gonadoopin,f-βCG ELISA KIT 硫鋅酸 Alphalipoic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%
大鼠游離雌三醇(FE3)試劑盒 Rat free Esiol,FE3 ELISA Kit 硫辛酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Alphalipoic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠游離(F-TESTO)ELISA檢測試劑盒RatFreeTestoterone,F-TESTOELISAKit 96T/48T 硫辛酸 HPLC≥98% 20mg
大鼠游離(F-TESTO)試劑盒 Rat Free Testosterone,F-TESTO ELISA Kit 硫藤黃素(>95%,BC) Thiolutin from Streptomyces luteosporeus 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BC
大鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA檢測試劑盒RatFreeThyroxine,FT4ELISAKit 96T/48T 硫酸壯觀霉素四水化合物 Spectinomycin sulfate tetrahydrate 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
大鼠游離甲狀腺素(FT4)試劑盒 Rat Free Thyroxine,FT4 ELISA Kit 硫酸長春質(zhì)堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Catharanthine sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA檢測試劑盒RatFreeProstateSpecificAigen,fPSAELISAKit 96T/48T 硫酸長春質(zhì)堿 HPLC≥98% 20mg
大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)試劑盒 Rat Free Prostate Specific Aigen,fPSA ELISA Kit 硫酸長春質(zhì)堿 Catharanthine sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠游離肉堿試劑盒 Rat Free Carnitine ELISA Kit 硫酸長春新堿/硫酸醛基長春堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Vincristine Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
注意事項(xiàng):
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。