二氧化氮（NO2）檢測(cè)試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
二氧化氮（NO2）檢測(cè)試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
二氧化氮（NO2）檢測(cè)試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
ACVR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
Hurt-78細(xì)胞，人T細(xì)胞淋巴瘤 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞,3T3-swiss albino細(xì)胞 人肺泡上皮細(xì)胞cDNAHPAEpiC cDNA
正常大鼠腎細(xì)胞;NRK
COS-1(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0174NRK-52E(大鼠腎小管導(dǎo)管上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞;RBL-2H3
CM-R028大鼠食管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
FAM3B Others Human 人 FAM3B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
YAC-1小鼠淋巴瘤細(xì)胞 YAC-1 mouse lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
IL17RD Protein Canine 重組狗 IL17RD 蛋白 (His 標(biāo)簽)
人脈絡(luò)絲表皮細(xì)胞 (HCPEpiC)( 5×105 ) 人臍帶血單個(gè)核細(xì)胞 Saos-2，人成骨肉瘤細(xì)胞
IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人胚胎心臟成纖維樣細(xì)胞;HEH2
人腎皮層上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
B16-Fo細(xì)胞，鼠黑色素瘤細(xì)胞系 WI-38(胚肺細(xì)胞) 人晶體上皮細(xì)胞永生系;SRA01/04(HLE)
CCL8 Protein Mouse 重組小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 標(biāo)簽)
SGC7901(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 HER2 / ErbB2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠碳酸酐酶2(CA-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人脫氫表雄酮(DHEA)免疫試劑盒 Human Dehydroepiandrosterone,DHEA ELISA Kit
動(dòng)植物組織葡萄糖含量測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
RatsolubleE-selectin,sE-selectinELISA試劑盒大鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
HumanInterleukin-2receptor,IL-2RELISA試劑盒人白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Humanmyosinheavychain,MHCELISAKit人肌球蛋白重鏈(MHC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔子睪酮(T)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human androgen receptor (AR) ELISA Kit 人雄激素受體(AR)ELISA試劑盒
Mouseanti-thyroid-globulinantibody,TGABELISAKit 小鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanEotaxin1ELISA試劑盒人嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織PKG-I激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
Humanpancreatickininogenase,PKELISAKit人*(PK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
二氧化氮（NO2）檢測(cè)試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)人白介素5(IL-5)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白介素35（IL-35）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白介素33(IL-33)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
