NO清除劑（NO Scavenger）5ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
NO清除劑（NO Scavenger）5ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
NO清除劑（NO Scavenger）5ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
PC-3M-IE8(人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株) 5×106cells/瓶×2
腸粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
CD36 Others Rat 大鼠 CD36 / SCARB3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
HASMC細(xì)胞，人大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 小鼠自發(fā)高癌細(xì)胞,TA2細(xì)胞 人虹膜色素上皮細(xì)胞cDNAHIPEpiC cDNA
大鼠氣管上皮細(xì)胞;RTE
DH82(犬巨噬細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0214SK-N-SH(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24
CL-0259BC-020(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
FAM171B Others Human 人 FAM171B / KIAA1946 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人顱骨造骨細(xì)胞cDNAHCO cDNA
豬腎細(xì)胞;PK(15) 骨髓瘤細(xì)胞，FO細(xì)胞 G422細(xì)胞，KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株
表達(dá)SV40T和EBNA1的人胚腎細(xì)胞;293ET
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Egypt/2321-NAMRU3/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人肺成纖維細(xì)胞 (HPF)( 5×105 )
人皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-HSF-1
CL-0277HCC94(人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化))5×106cells/瓶×2
人肺粘液上皮樣癌細(xì)胞;NCI-H292 大鼠表皮黑色素細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
MFC 小鼠胃癌細(xì)胞
TFRC Others Human 人 TFRC / CD71 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠羧甲基賴酸(CML)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人突觸泡蛋白抗體(SYP-Ab)免疫試劑盒 Human anti-synaptophysin antibody,SYP-Ab ELISA kit
植物組織果糖含量測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
RatsolubleInterleukin2recepter,IL-2sRELISA試劑盒大鼠白介素2可溶性受體(IL-2sR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Humanintrinsicfactorantibody,IFAELISA試劑盒人抗內(nèi)因子抗體(IFA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
HumanMyosin，MYSELISAKit人肌球蛋白(MYS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔子凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human vasopeptidase inhibitors (VPI) ELISA Kit 人血管活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA試劑盒
HumanAnti-phosphatidylserineantibody,APSAELISAKit 人抗磷脂酰*抗體(APSA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanEpinephrine/Adrenaline,EPIELISA試劑盒人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織PRK2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
Humanp53/tumorprotein，p53/TP53ELISAKit人P53(P53)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
NO清除劑（NO Scavenger）5ml實(shí)驗(yàn)方法人白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白介素16(IL-16)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白介素15(IL-15)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白介素13(IL-13)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
