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預混型丙烯酰胺 - 甲叉雙丙烯干粉 (29:1)100g運輸

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  • 型號
  • 品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時間2017-07-14
  • 廠商性質經(jīng)銷商
  • 入駐年限9
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  • 產(chǎn)品數(shù)量9968
  • 人氣值79823
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預混型丙烯酰胺 - 甲叉雙丙烯干粉 (29:1)100g運輸使用方法 一、準備工作 1. 用固相 RNase 清除劑清潔工作的臺面和器皿(詳見該產(chǎn)品的使用手冊)。 2. 配制 1 X 電泳緩沖液 將適量的 10X 電泳緩沖液用 RNase-free 水稀釋 10 倍,得到 1X 電泳緩沖液待用。
預混型丙烯酰胺 - 甲叉雙丙烯干粉 (29:1)100g運輸 產(chǎn)品詳情

預混型丙烯酰胺 - 甲叉雙丙烯干粉 (29:1)100g運輸產(chǎn)品及特點:

尿素-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Urea PAGE)是目前分離 200 nt 以下的小片段 RNA,尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是單獨 配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點: 1. 一站式,含有電泳所需要的所有試劑,即開即用,十分方便,免去了 實驗人員稱取有毒物品。 2. 靈活,可以根據(jù)需要配制各種濃度的 Urea-PAGE,以便對長度各異 RNA 進行電泳。 3. 電泳后可直接用于 UV 觀察、銀染、膠回收、Northern 雜交和放射自 顯影等。 4. 使用新型緩沖液,可以防止甘油的干擾。
預混型丙烯酰胺 - 甲叉雙丙烯干粉 (29:1)100g運輸使用方法:
一、準備工作
1. 用固相 RNase 清除劑清潔工作的臺面和器皿(詳見該產(chǎn)品的使用手冊)。
2. 配制 1 X 電泳緩沖液 將適量的 10X 電泳緩沖液用 RNase-free 水稀釋 10 倍,得到 1X 電泳緩 沖液待用。
3. 配制 10%過硫酸銨溶液 精確稱取約 100 mg 過硫酸銨到一干凈的 1.5 mL 離心管中,按每 1 mg 過硫酸銨加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水,搖晃致溶, 立即使用。注意:放置時間不要超過一周。
二、配制凝膠
1. 估計所需要的凝膠溶液的體積,一般配制一塊 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的膠需要 15 mL 凝膠溶液,配制一塊 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的膠 需要 120 mL 凝膠溶液。
2. 新鮮的 40%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液的配制:在裝有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入約 130 mL 自備的去離子水,然后將全部甲叉雙丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液沖洗出來以避免粉末有 毒粉末飄出。甲叉雙丙烯酰胺溶解度低,不會溶解在這少量溶液中)。充 分搖晃混勻后所得溶液即 40% Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是這樣可以在下步留出足夠空間加尿素。
3. 根據(jù)所需要的凝膠溶液的體積,在一的干凈的三角瓶中按下表加入各成分
4. 攪拌并加熱到 40-50左右,直到尿素*溶解。
5. 冷卻到室溫后,將三角瓶接上真空系統(tǒng)抽真空處理 10-15 分鐘以充分去 除溶液中的氧氣(氧氣會降低聚合反應效率)。但如果實驗條件有限,此 步也可以省略。
6. 邊搖晃溶液變加入 50 uL TEMED 500 uL 10%過硫酸銨。注意:即 使選擇其他工作濃度的 Acrylamide/BisTEMED 10%過硫酸銨的用 量也不需要隨之改變。但如果配置的凝膠溶液的體積變化,TEMED 10%過硫酸銨的用量也要按比例改變。
7. 再充分搖晃約 30 秒后迅速灌膠,然后插入樣品梳。
8. 室溫放置 30-60 分鐘使膠凝固。
9. 將凝膠板放置在電泳裝置上后,在上下層分別加入適當量的 1X 電泳緩沖 液。如果不馬上使用,需要有濕紙將上樣孔端蓋住以防凝膠過度干燥。
10. 拔出梳子后用加樣槍吸取電泳緩沖液,充分將每個加樣空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和氣泡吹打出來。
預混型丙烯酰胺 - 甲叉雙丙烯干粉 (29:1)100g運輸后續(xù)處理:
1. 染色觀察:將凝膠一面的玻璃板揭開,直接用仍然附著在另一玻璃板上的 凝膠進行各種染色,包括銀染(固定、漂洗、顯影和定影等步驟)、EB(每 100 mL 1×TBE 中加 20 uL 10mg/mL EB 溶液)、天澤基因低毒核 酸染料 DNAgreen(每 100 mL 1×TBE 中加 10 uL DNAgreen 原液)。 UV 下觀察并拍照。
2. miRNA 回收:按上法用 EB 等染料染色后,UV 下確定所需要的 miRNA 條帶的位置,切膠后進行膠回收處理。
3. Northern 雜交:按上法用 EB 等染料染色后,UV 下確定所需要的 miRNA 條帶的位置,切膠后電轉移到帶正電的尼龍膜上,然后進行雜交處理。
4. 放射自顯影:如果 miRNA 樣品電泳前經(jīng)過同位素標記,則將凝膠一面的 玻璃板揭開,用濾紙將附著在另一玻璃板上的凝膠吸附過來,然后包上保 鮮膜,真空抽干,然后使膠跟 X 光片向對置進行放射自顯影。
CL-0186PIEC(豬髖動脈內皮細胞 )5×106cells/瓶×2

FST Others Mouse 小鼠 Follistatin / FST ( FS288 ) CHO細胞裂解液 (陽性對照)

人臍靜脈內皮細胞裂解物HUVECL

小耳豬腎細胞;SEPfk 癌細胞,MDA-MB-468細胞 WK256細胞,大鼠肉瘤細胞

SV40T轉化人臍靜脈內皮細胞;PUMC-HUVEC-T1

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
人外殼細胞(HHorSC)( 5×105 )

人腦瘤細胞;SF767

CL-0455TE671 subline No.2(人橫紋肌肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2

人細胞;C-33A 大鼠主動脈內皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

b16 小鼠黑色素瘤細胞

TIE1 Others Human Tie1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人腦瘤細胞;SF767

人外殼細胞(HHorSC)( 5×105 )

CL-0455TE671 subline No.2(人橫紋肌肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2

人細胞;C-33A 大鼠主動脈內皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

b16 小鼠黑色素瘤細胞

TIE1 Others Human Tie1 人細胞裂解液 (陽性對照)
Anti-NGX6 /FITC 熒光素標記鼻咽癌細胞相關基因6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Anti-WNT9A/WNT14/FITC 熒光素標記信號通路Wnt9a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Bcl-2抗體 Anti-Bcl-2 0.1ml

Goat Anti-human IgG/Bio *標記的羊抗人IgG 0.1ml

GALC/Galactosylceramidase 英文名稱: 半乳糖神經(jīng)酰胺酶抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh PPP2R3 蛋白質磷酸酶2A亞基3抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-WNT9A/WNT14/FITC 熒光素標記信號通路Wnt9a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-human IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的羊抗人IgG 0.1ml

Phospho-Glycogen synthase 1(Ser640) 英文名稱: 磷酸化葡萄糖合成酶1抗體 0.1ml

Bax抗體 Anti-Bax 0.1ml

Anti-NGN3/FITC 熒光素標記神經(jīng)元素3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh PPP2R3A 蛋白質磷酸酶2調節(jié)亞基3A抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-WNT5A/FITC 熒光素標記信號通路Wnt5a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
預混型丙烯酰胺 - 甲叉雙丙烯干粉 (29:1)100g運輸IL-23 小鼠白介素-23Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Eph receptor B2/Ephb2 Ephb2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh MTCH2 線粒體載體同源蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml

ECP(Human eosinophil cationic protein) ELISA Kit 人嗜酸性粒細胞陽離子蛋白 96T

SIT 英文名稱: 跨膜接頭蛋白SIT抗體 0.1ml

IL2RA 英文名稱: 白介素2受體a/IL-2RA抗體 0.1ml

Anti-Eph receptor B2/Ephb2 Ephb2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

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