DNA 包被溶液100mL規(guī)格詳細(xì)說明書:
DNA 包被溶液100mL規(guī)格使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時(shí),乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時(shí),請(qǐng)?jiān)诘?/span> 8 步之后進(jìn)行。
DNA 包被溶液100mL規(guī)格確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級(jí)雜交液跟印跡膜進(jìn)行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會(huì)非特異地吸附探針分子的位點(diǎn)封閉,否則這些位點(diǎn)會(huì)吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤(rùn)。
2. 將濕潤(rùn)的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個(gè)小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級(jí)雜交液的比例沿小口 加入超級(jí)雜交液,然后用塑料封口機(jī)將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時(shí),延長(zhǎng)到 12-16 小時(shí)亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動(dòng)狀態(tài)中,使超級(jí)雜交液與印跡膜充分接觸。
DNA 包被溶液100mL規(guī)格步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計(jì)算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機(jī)封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測(cè)基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對(duì)于檢測(cè)克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時(shí)間一般為 6-12 小時(shí)。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠游離甲狀腺激素(FT3)ELISA試劑盒 ,英文名: FT3 ELISA Kit
人補(bǔ)體因子H(CFH)ELISA檢測(cè)試劑盒HumancomplementfactorH,CFHELISAKit 96T/48T
大鼠白介素18(IL-18)免疫試劑盒 Rat Interleukin 18,IL-18 Elisa Kit
CLIAKitforTBM(Humantubularbasementmembraneantibogy)ELISAKit人抗腎小管基底膜抗體規(guī)格:48T/96T
人體hTERT表達(dá)實(shí)時(shí)定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitCCP人抗環(huán)胍氨酸肽抗體規(guī)格:48T/96T
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因于α(TGFα)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)免疫試劑盒 Human angiostatin,ANG ELISA Kit
人抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)ELISA試劑盒 ,英文名: LMA ELISA Kit
RatInterleukin13,IL-13ELISA試劑盒大鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanglucocorticoidreceptor-α,GR-αELISA試劑盒人糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterleukin3,IL-3ELISAKit人白介素3(IL-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human aquaporin 2 (AQP-2) ELISA Kit 人水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒
Humancholesterolestertransferprotein,CETPELISAKit 人*酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanapelin13,AP13ELISA試劑盒人apelin13(AP13)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物氧化應(yīng)激活性氧(ROS)熒光測(cè)定試劑盒(次氯酸離子)20次
Humantotalprostatespecificantigen,tPSAELISAKit人總前列腺特異抗原(tPSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
13(S)-HODE (100 ug) 13S-xy7noxy-9Z,11E-octadecadienoic acid; 13(S)-HODE
LB 42708 (10 mg) [1-[[1-[(4-bromopxenyl)metxyl]-1H-imidazol-5-yl]metxyl]-4-(1-naphthalenyl)-1H-pyrrol-3-yl]-4-morpholinyl-metxanone
DiD Perchlorate 超級(jí)純 DiD Perchlorate UltraPure Grade
Levetiracetam (50 mg) (αS)-etxyl-2-oxo-1-pyrrolidineacetamide; UCB-L 059|Kea ; Levetiracetam
Stearoyl Ethanolamide (5 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-octadec*; Ceramid|Stearic Acid Ethanolamide; Stearoyl Ethanolamide
5,7-Dixy7noxy-2-(4-xy7noxypxenyl)-4H-1-benzopyran-4-one; Chamomile; Flavone; NSC 83244; Versulin Apigenin
HBV env (183–191)Phe-Leu-Leu-Thr-Arg-Ile-Leu-Thr-Ile
β- Amyloid (8-38)Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly-Gly
[Pro34]Peptide YY, PYY, humanTyr-Pro-Ile-Lys-Pro-Glu-Ala-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Ser-Pro-Glu-Glu-Leu-Asn-Arg-Tyr-Tyr-Ala-Ser-Leu-Arg-His-Tyr-Leu-Asn-Leu-Val-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr- NH2
Boc-Cholecystokinin Octapeptide (desulfated)Boc-Asp-Tyr-Met-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH2
Pancreatic Polypeptide, avianGly-Pro-Ser-Gln-Pro-Thr-Tyr-Pro-Gly-Asp-Asp-Ala-Pro-Val-Glu-Asp-Leu-Ile-Arg-Phe-Tyr-Asp-Asn-Leu-Gln-Gln-Tyr-Leu-Asn-Val-Val-Thr-Arg-His-Arg-Tyr-NH2
DNA 包被溶液100mL規(guī)格2,4-二錄本甲酰錄2,4-Dichlorobenzoyl chloride250mL
MD25-7透析袋(半周長(zhǎng)25mm,直徑16mm,截留分子量7000Da)5米/卷0
S4251-100GStarch Soluble 可溶性淀粉9005-84-9100g
EB染色液(10mg/ml)1ml
錄化鋰100g