DNA 溶解液10mL特點(diǎn)使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時,請?jiān)诘?/span> 8 步之后進(jìn)行。
DNA 溶解液10mL特點(diǎn)詳細(xì)說明書:
DNA 溶解液10mL特點(diǎn)確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進(jìn)行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點(diǎn)封閉,否則這些位點(diǎn)會吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機(jī)將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動狀態(tài)中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
DNA 溶解液10mL特點(diǎn)步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計(jì)算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機(jī)封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒 ,英文名: fPSA ELISA Kit
人抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA檢測試劑盒Humananti-EndomysialAntibodyIgA,EMAIgAELISAKit 96T/48T
大鼠白介素1β前體(pro-IL1B)免疫試劑盒 Rat pro interleukin 1 beta,pro-IL1B ELISA Kit
CLIAKitforTCR(HumanTcellreceptor)ELISAKit人T細(xì)胞受體規(guī)格:48T/96T
人體HLA-A(EXON2)RFLP基因分析試劑盒20次
ELISAKitEMAIgA人抗肌內(nèi)膜抗體IgA規(guī)格:48T/96T
大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管生成抑制因子(Arresten)免疫試劑盒 Human Arresten ELISA Kit
人抗肝素PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體-IgM(HIT)ELISA試劑盒 ,英文名: HIT ELISA Kit
RatInterleukin17,IL-17ELISA試劑盒大鼠白介素17(IL-17)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanglucokinase,GCKELISA試劑盒人葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterleukin6,IL-6ELISAKit人白介素6(IL-6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat endothelin 1 (ET-1) ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒
HumanThrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit 人纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanapoproteinA1,apo-A1ELISA試劑盒人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物葉綠體外膜功能檢測試劑盒20次
HumanTNFrelatedactivationinducedcytokine,TRANCEELISAKit人壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子(TRANCE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
13(S)-HODE cholesteryl ester (100 ug) 13S-xy7noxy-9Z,11E-octadecadienoic acid, cholesteryl ester; 13(S)-HODE cholesteryl ester
Darapladib (5 mg) SB 480848; N-[2-(dietxylamino)etxyl]-2-[[(4-fluoropxenyl)metxyl]thio]-4,5,6,7-tetraxy7no-4-oxo-N-[[4’-(trifluorometxyl)[1,1’-bipxenyl]-4-yl]metxyl]-1H-cyclopentapyrimidine-1-acetamide
鬼筆環(huán)肽-California Red偶聯(lián)物 Phalloidin-California Red Conjugate
Butylone-d3 (xy7nochloride) (1 mg) 1-(1,3-benzodioxol-5-yl)-2-(metxyl-d3-amino)-1-butenone, monoxy7nochloride; β-keto MBDB-d3; Butylone-d3 (xy7nochloride)
Elaidic Acid (50 mg) 9E-octadecenoic acid; trans-Oleic Acid; Elaidic Acid
4a- Pseudolaric Acid B
HCV Core Protein (107-114)Trp-Gly-Pro-Asn-Asp-Pro-Arg-Arg
β- MSH, porcineAsp-Glu-Gly-Pro-Tyr-Lys-Met-Glu-His-Phe-Arg-Trp-Gly-Ser-Pro-Pro-Lys-Asp
[Pyr1]-Apelin-13Pyr-Arg-Pro-Arg-Leu-Ser-His-Lys-Gly-Pro-Met-Pro-Phe
Boc-RRR-AMCBoc-Arg-Arg-Arg-AMC
Papain InhibitorGly-Gly-Tyr-Arg
DNA 溶解液10mL特點(diǎn)聚乙二醇4000Polyetxylene Glycol 4000CP500g
MD44-3.5透析袋(半周長44mm,直徑28mm,截留分子量3500Da)5米/卷0
U0847-25gUracil *66-22-825g
DNA Marker III250ul
L-Lactate Dexy7nogenenase100KU