購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細胞價格并預約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。產(chǎn)品僅用于科研
| 產(chǎn)品名稱 | BL21-Star(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞 100ul*10 |
| 包裝 | 100ul*10 |
| 分類 | 克隆感受態(tài)細胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
E-Cad 小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白 規(guī)格： 48T/96T
CNP 小鼠C型鈉尿肽 規(guī)格： 48T/96T
C-Peptide 小鼠C肽 規(guī)格： 48T/96T
CRP 小鼠C反應蛋白 規(guī)格： 48T/96T
CXCR3 小鼠CXC趨化因子受體3 規(guī)格： 48T/96T
BF 小鼠B因子 規(guī)格： 48T/96T
Bcl-2 小鼠B細胞淋巴瘤因子2 規(guī)格： 48T/96T
Bid 小鼠BH3結構域凋亡誘導蛋白 規(guī)格： 48T/96T
AP12 小鼠apelin 12 規(guī)格： 48T/96T
8-iso-PG 小鼠8異前列腺素 規(guī)格： 48T/96T
8-OHdG 小鼠8羥基脫氧鳥苷 規(guī)格： 48T/96T
6-keto-PGF1a 小鼠6酮前列腺素F1a 規(guī)格： 48T/96T
6-K-PG 小鼠6酮前列腺素 規(guī)格： 48T/96T
5-HT 小鼠5羥色胺 規(guī)格： 48T/96T
5-NT 小鼠5核苷酸酶 規(guī)格： 48T/96T
Col Ⅳ 小鼠Ⅳ型膠原 規(guī)格： 48T/96T
PⅢNP 小鼠Ⅲ型前膠原肽 規(guī)格： 48T/96T
BL21-Star(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞 100ul*10 PⅢNT 小鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽 規(guī)格： 48T/96T
Col Ⅲ 小鼠Ⅲ型膠原 規(guī)格： 48T/96T
Col Ⅱ 小鼠Ⅱ型膠原 規(guī)格： 48T/96T
OH 小鼠25羥基*3 規(guī)格：
shēng huà shì jì 乙二醇 容量： RT，避光 5克
shēng huà shì jì 乙二胺鹽酸鹽 容量： 25克
shēng huà shì jì 乙二胺四乙酸鐵鈉鹽 容量： 1克
shēng huà shì jì 乙二胺四乙酸四鈉鹽 容量： 1克
shēng huà shì jì 乙二胺四乙酸三鉀鹽 容量： 5毫克
shēng huà shì jì 乙二胺四乙酸二鈉鹽 容量： 500毫克
shēng huà shì jì 乙二胺四乙酸二鈉鋅鹽 容量： 2～8℃ 100克
shēng huà shì jì 乙二胺四乙酸二鈉銅鹽 容量： 2～8℃ 250毫克
shēng huà shì jì 乙二胺四乙酸二鈉錳鹽 容量： 5克
shēng huà shì jì 乙二胺四乙酸二鈉鎂鹽四水物 容量： 2～8℃ 1毫克
shēng huà shì jì 乙二胺四乙酸二鈉鎂鹽 容量： 2～8℃ 100毫克
shēng huà shì jì 乙二胺四乙酸二鈉鈣鹽 容量： 1克
shēng huà shì jì 乙二胺四乙酸二鉀鹽 容量： 保存：-20℃ 5毫克
shēng huà shì jì 乙二胺四乙酸 容量： 2～8℃ 250毫克
shēng huà shì jì 乙醇脫氫酶 容量： 100克
shēng huà shì jì 乙胺鹽酸鹽 容量： 2～8℃ 10毫升
shēng huà shì jì 移液器吸頭 容量： 2～8℃ 25U
shēng huà shì jì 移液器P5000 容量： RT，避光 100克
shēng huà shì jì 移液器P50 容量： 1克
48T/96T
注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時應輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。
