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| 產(chǎn)品名稱 | F-DH5α 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*100 |
| 包裝 | 100ul*100 |
| 分類 | 克隆感受態(tài)細(xì)胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。
shēng huà shì jì 胭脂紅 容量： RT，避光 1克
shēng huà shì jì *測(cè)定培養(yǎng)基 容量： 50張/盒
shēng huà shì jì 亞硝基紅鹽 容量： RT，避光 10克
shēng huà shì jì 亞鐵氫化鉀 容量： RT 1克
shēng huà shì jì 亞試劑 容量： RT 25克
shēng huà shì jì 亞硫酸鹽瓊脂 容量： 2～8℃ 25毫升
shēng huà shì jì 亞硫酸鹽多粘菌素*瓊脂基礎(chǔ) 容量： 2～8℃ 25毫升
shēng huà shì jì 亞硫酸鐵瓊脂 容量： 100克
shēng huà shì jì 亞硫酸鈉瓊脂 容量： 1公斤
F-DH5α 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*100shēng huà shì jì 亞硫酸鈣 容量： RT 5克
shēng huà shì jì 亞硫酸鉍指示劑 容量： 1米
shēng huà shì jì 亞硫酸鉍瓊脂基礎(chǔ) 容量： RT 10克
shēng huà shì jì 亞硫酸銨 容量： 1克
shēng huà shì jì 亞磷酸三丁酯 容量： RT 100克
shēng huà shì jì 亞磷酸三苯酯 容量： 100毫克
shēng huà shì jì 亞利桑那菌瓊脂 容量： RT 1米
shēng huà shì jì 亞精胺 容量： 2～8℃ 10克
shēng huà shì jì 亞甲基藍(lán) 容量： 100克
shēng huà shì jì 亞鈷鈉 容量： 500克
shēng huà shì jì 亞碲酸鹽肉湯基礎(chǔ) 容量： 100克
shēng huà shì jì 亞碲酸鹽卵黃增菌液 容量： 1米
shēng huà shì jì 亞碲酸鉀 容量： 100
GHRP 牛生長(zhǎng)激素釋放多肽 規(guī)格： 48T/96T
EPI 牛腎上腺素 規(guī)格： 48T/96T
NP-Y 牛神經(jīng)肽Y 規(guī)格： 48T/96T
LF/LTF 牛乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白 規(guī)格： 48T/96T
LS 牛乳糖合成酶 規(guī)格： 48T/96T
G6PD 牛葡萄糖6磷酸脫氫酶 規(guī)格： 48T/96T
CS 牛檸檬酸合成酶 規(guī)格： 48T/96T
PCK 牛磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 規(guī)格： 48T/96T
PFK 牛磷酸果糖激酶 規(guī)格： 48T/96T
牛淋巴細(xì)胞因子ELISA Kit，48T/96T 牛淋巴細(xì)胞因子ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T
B7-2/sCD86 ?？扇苄园准?xì)胞分化抗原86 規(guī)格： 48T/96T
MT 牛金屬硫蛋白 規(guī)格： 48T/96T
Hpt/HP 牛結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白 規(guī)格： 48T/96T
CG 牛甘膽酸 規(guī)格： 48T/96T
sIgA 牛分泌型免疫球蛋白A 規(guī)格： 48T/96T
sIgA 牛分泌型免疫球蛋白A 規(guī)格： 48T/96T
牛的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)ELISA Kit，48T/96T 牛的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T
CIAP 牛的牛小腸堿性磷酸酶 規(guī)格： 48T/96T
Cholic acid 牛膽酸 規(guī)格： 48T/96T
E2 牛雌二醇 規(guī)格： 48T/96T
克
注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無(wú)菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。
