購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細胞價格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。產(chǎn)品僅用于科研
| 產(chǎn)品名稱 | GT115 感受態(tài)細胞 100ul*50 |
| 包裝 | 100ul*50 |
| 分類 | 克隆感受態(tài)細胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
shēng huà shì jì 吐溫40 容量： 2～8℃ 10克
shēng huà shì jì 吐溫20 容量： 10克
shēng huà shì jì 土耳其紅油 容量： RT 5克
shēng huà shì jì 透析用玻璃紙 容量： 保存：-20℃ 100毫克
shēng huà shì jì 透析袋夾 容量： 1條
shēng huà shì jì 透析袋8DM,10MD 容量： 保存：-20℃ 1000u
shēng huà shì jì 透析袋7000 容量： HC1000u
shēng huà shì jì 透析袋6000 容量： 1000u
shēng huà shì jì 透析袋4000 容量： 200u
GT115 感受態(tài)細胞 100ul*50shēng huà shì jì 透析袋36DM,44MD 容量： LC200u
shēng huà shì jì 透析袋3500 容量： 1000u
shēng huà shì jì 透析袋3000 容量： 200u
shēng huà shì jì 透析袋27DM,34MD 容量： 保存：-20℃ LC200u
shēng huà shì jì 透析袋20DM,25MD 容量： LC1000u
shēng huà shì jì 透析袋17，8DM,77MD 容量： LC1000u
shēng huà shì jì 透明質(zhì)酸鈉 容量： 1公斤
shēng huà shì jì 透明質(zhì)酸酶 容量： RT 1克
shēng huà shì jì *鈉 容量： 25克
shēng huà shì jì *鈉 容量： RT 5克
shēng huà shì jì *C鋅鹽 容量： 5克
shēng huà shì jì 銅鐵試劑 容量： 100克
shēng huà shì jì 銅絲 容量： 2～8℃ 25克
shēng huà shì jì 銅片 容量： 2～8℃ 1克
shēng huà shì jì 銅粉 容量： 2～8℃ 500
TpP 大鼠血栓前體蛋白 規(guī)格： 48T/96T
TM 大鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白 規(guī)格： 48T/96T
CH50 大鼠血清總補體 規(guī)格： 48T/96T
NO 大鼠血清一氧化氮 規(guī)格： 48T/96T
SAA 大鼠血清淀粉樣蛋白A 規(guī)格： 48T/96T
GMP-140 大鼠血漿α顆粒膜蛋白 規(guī)格： 48T/96T
HO-2 大鼠血紅素氧合酶2 規(guī)格： 48T/96T
HO-1 大鼠血紅素氧合酶1 規(guī)格： 48T/96T
ADAMTS13/vWF-cp 大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶 規(guī)格： 48T/96T
VWF 大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子 規(guī)格： 48T/96T
BK 大鼠血管舒緩激肽 規(guī)格： 48T/96T
ANG-R-Tie2 大鼠血管生成素受體Tie2 規(guī)格： 48T/96T
ANG-R-Tie1 大鼠血管生成素受體Tie1 規(guī)格： 48T/96T
ANG-4 大鼠血管生成素4 規(guī)格： 48T/96T
ANG-2 大鼠血管生成素2 規(guī)格： 48T/96T
ANG-1 大鼠血管生成素1 規(guī)格： 48T/96T
ANG 大鼠血管生長素 規(guī)格： 48T/96T
VCAM-1/CD106 大鼠血管內(nèi)皮細胞粘附分子1 規(guī)格： 48T/96T
VEGFR-2 大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體2 規(guī)格： 48T/96T
VEGFR-1 大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1 規(guī)格： 48T/96T
VEGF-D 大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子D 規(guī)格： 48T/96T
VEGF-C 大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子C 規(guī)格： 48T/96T
VEGF-B 大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子B 規(guī)格： 48T/96T
毫克
shēng huà shì jì 銅箔 容量： RT，避光 25克
注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。
