產(chǎn)品介紹:
產(chǎn)品原理:本產(chǎn)品檢測(cè)原理基于碘化丙啶(Propidium, PI)染色方法分析細(xì)胞周期和凋亡。碘化丙啶是一種雙鏈DNA染料,其嵌入雙鏈DNA中可以產(chǎn)生熒光,并且熒光的強(qiáng)度和雙鏈DNA的量成正比。 在細(xì)胞周期中,G0和G1期細(xì)胞有一套染色體,G2和M期細(xì)胞有兩套染色體,S期介于兩者之間。經(jīng)過(guò)碘化丙啶染色后,處在不同細(xì)胞周期中的細(xì)胞的熒光強(qiáng)度是不一樣的。假定G0和G1期的細(xì)胞熒光強(qiáng)度為1,那么G2和M期的細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為2,S期的細(xì)胞介于1和2之間。 細(xì)胞凋亡時(shí),由于細(xì)胞核皺縮和DNA片段化,染色時(shí)DNA片段會(huì)從打孔的細(xì)胞膜處丟失,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),熒光強(qiáng)度小于1,即Sub-G1峰或者凋亡細(xì)胞峰。 細(xì)胞凋亡也可以用流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞光散射的變化來(lái)檢測(cè)。凋亡前期,染色質(zhì)皺縮,細(xì)胞密度增加,前向角光散色顯著降低。凋亡后期,細(xì)胞產(chǎn)生凋亡小體,前向角光散射和側(cè)向角光散色都顯著降低。 產(chǎn)品適用:本試劑盒可用于培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或者懸浮細(xì)胞檢測(cè),也可用于組織細(xì)胞檢測(cè)。 保存條件:-20°避光條件下,保存1年以上,4°避光條件下,可以保存2個(gè)月。 |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
50次/200次/500次 | FS-X9728 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
白介13(IL-13)英文名:IL-13 脂肪炎癥因子Apelin抗體包裝25g
白介12(IL-12)英文名:IL-12 氫ATP通道蛋白抗體包裝5g
白介11(IL-11)英文名:IL-11 ATP5A抗體包裝25g
白介10(IL-10)英文名:IL-10 即刻早期基因ARC抗體包裝5g
白介10(IL-10)英文名:IL-10 ADP核糖基化因子6抗體包裝5g
白介1(IL-1)英文名:IL-1 芳香化抗體包裝1g
白介1(IL-1)英文名:IL-1 Artemin抗體包裝25g
白蛋白(albumin)英文名:albumin alpha 1腎上腺能受體A抗體包裝5g
白蛋白(ALB)英文名:ALB 血管緊張Ⅱ-1型受體抗體包裝1g
胺氧化(含黃)A(MAOA)英文名:MAOA 活化轉(zhuǎn)錄因子3抗體包裝5g
癌胚抗原(CEA/CD66)英文名:CEA/CD66 血管緊縮樣蛋白1抗體包裝250mg
癌胚抗原(CEA)英文名:CEA 自噬相關(guān)蛋白7抗體包裝1g
阿立新A(Orexin A)英文名:Orexin A 炭疽受體2抗體包裝1g
γ突觸核蛋白(SNCG)英文名:SNCG 自噬相關(guān)蛋白4C抗體包裝5g
γ干擾誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)英文名:IFI16/p16 自噬蛋白5/凋亡的特異性蛋白抗體包裝5g
磷化蛋白激AKT1抗體基質(zhì)金屬蛋白10(MMP10)CCG-1423是一種新型的RhoA/C介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)錄抑制劑,能抑制的轉(zhuǎn)移前列腺癌PC-3侵襲模型。
細(xì)胞周期與凋亡檢測(cè)試劑盒小托柄鵝膏 -3-醋酸甲酯抗酸性磷酸5b
乳酸克魯維酵母 呋喃-2,5-二基二甲抗肽
洋蔥伯克霍爾德 2-酸己酯;巴豆酸己酯抗肽LL37
海水芽孢桿 2,2-二苯基乙抗蘭尼堿受體鈣釋放通道抗體
鐮刀 -3,5-二磺酸鈉抗磷脂A2抗體
山地青霉 O-叔丁基-L-抗磷脂酰甘油IgG抗體
白乳菇 吡啶氫鹽抗麥膠蛋白;麥溶蛋白抗體
茯苓 3-甲氧基嘧啶抗球蛋白結(jié)合蛋白抗體
米根霉 3,4,5-氧基肉桂酸乙酯抗內(nèi)皮抗體
釀酒酵母 2-(1-)苯并咪唑抗凝血Ⅲ
莓形炭團(tuán) 一三-β-環(huán)糊精抗凝血Ⅲ抗體
青枯假單胞 硝酸銅(含2.5個(gè)結(jié)晶水)抗凝血抗體
禾谷絲核 3-基抗凝血抗體IgG
黑輪層碳?xì)?/span> 3--2,6-二氟苯甲抗平滑肌抗體
豬水泡病病 間苯二甲酸單甲酯抗去唾液酸糖蛋白受體抗體