細(xì)胞凋亡DNA Ladder提取試劑盒(柱式吸附)公司正在出售的產(chǎn)品：木質(zhì)素過(guò)氧化物酶（LiP）測(cè)試盒 規(guī)格：100管/96樣 測(cè)試方法：微量法
N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（NAG）測(cè)試盒 規(guī)格：50管/24樣 測(cè)試方法：可見(jiàn)分光光度法
抗壞血酸（AsA）/維生素含量測(cè)試盒 規(guī)格：50管/48樣 測(cè)試方法：滴定法
甘油三酯（TG）含量測(cè)試盒 規(guī)格：100管/96樣 測(cè)試方法：微量法
蘋(píng)
產(chǎn)品介紹：
本試劑盒是目前先進(jìn)的DNA Ladder抽提試劑盒之一。本試劑盒是針對(duì)細(xì)胞凋亡過(guò)程中產(chǎn)生的核小體間DNA鏈斷裂而設(shè)計(jì)的?？梢苑浅Ｓ行У爻樘嵝∑螢?80-200bp的DNA ladder，同時(shí)又可以抽提到大50kb左右的基因組DNA。本試劑盒可以抽提50個(gè)樣品。 DNA ladder也稱DNA fragmentation，是細(xì)胞凋亡的一個(gè)重要指標(biāo)。通常觀察到DNA ladder，就可以判定細(xì)胞發(fā)生了凋亡。 樣品首先被蛋白酶K消化，隨后加入適合DNA結(jié)合到純化柱上的緩沖液，然后加入到純化柱內(nèi)。通過(guò)高速離心，使DNA在穿過(guò)純化柱的瞬間，結(jié)合到純化柱上，隨后通過(guò)兩次洗滌去除各種雜質(zhì)，后通過(guò)洗脫液把DNA洗脫下來(lái)。整個(gè)過(guò)程無(wú)需酚抽提，無(wú)需酒精沉淀，樣品裂解后僅需約15分鐘即可完成。 通過(guò)DNA純化柱方式抽提DNA ladder比用傳統(tǒng)的酚抽提酒精沉淀方法更加便捷，小片段DNA不容易損失。試劑盒提供了RNase A，可以獲得不含RNA的高純度總DNA，排除了RNA對(duì)DNA ladder觀察造成的干擾。 本試劑盒每次多可以抽提20mg組織或200-350萬(wàn)個(gè)培養(yǎng)細(xì)胞。樣品用量過(guò)多，反而會(huì)影響抽提效果。純化柱對(duì)于DNA的大容量約為30微克。通常每200萬(wàn)Hela細(xì)胞或500萬(wàn)淋巴細(xì)胞可以抽提得到15-25微克總DNA，每25mg肝、腦、腎組織可以抽提得到10-30微克總DNA，每25毫克心、肺組織可以抽提得到5-10微克總DNA，每10mg脾組織可以抽提得到5-30微克總DNA。樣品的用量請(qǐng)勿超過(guò)純化柱的容量，樣品用量好能保持在純化柱容量的70%或以下。當(dāng)然過(guò)少的樣品也不利于檢測(cè)到DNA ladder。 對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞的凋亡檢測(cè)，通常6孔板一個(gè)孔的細(xì)胞就足夠用于DNA ladder的抽提和檢測(cè)。 試劑盒組份： 樣品裂解液A——————10ml 樣品裂解液B——————11ml 洗滌液I——————21ml(第一次使用前加入7ml無(wú)水乙醇) 洗滌液II——————16ml (第一次使用前加入24ml無(wú)水乙醇) 洗脫液——————22ml 蛋白酶K——————1.1ml RNase A——————220μl DNA純化柱及廢液收集管——————50套 儲(chǔ)存條件：室溫，有效期一年。( 蛋白酶K需-20℃保存) |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
DNA Ladder Extraction Kit with Spin Column | 50次 | FS-X9526 |
注意事項(xiàng)：
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性，則測(cè)定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對(duì)較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè)，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作步驟：
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
氨酸脫氫酶2(PRODH2)檢測(cè)試劑盒 forProlineDehydrogenase2(PRODH2)
鱷失調(diào)蛋白(ATCAY)檢測(cè)試劑盒 forCaymanAtaxia(ATCAY)
基質(zhì)金屬蛋白酶8(MMP8)檢測(cè)試劑盒 forMatrixMetalloproteinase8(MMP8)
纖維蛋白肽A(FPA)檢測(cè)試劑盒 forFibrinopeptideA(FPA)
纖維蛋白原相關(guān)蛋白1(FGL1)檢測(cè)試劑盒 forFibrinogenLikeProtein1(FGL1)
生長(zhǎng)分化因子2(GDF2)檢測(cè)試劑盒 forGrowthDifferentiationFactor2(GDF2)
泛醌蛋白4(UBQLN4)檢測(cè)試劑盒 forUbiquilin4(UBQLN4)
蛋白激酶Cε(PKCε)檢測(cè)試劑盒 forProteinKinaseCEpsilon(PKCe)
矢車菊苷β6(CENTβ6)檢測(cè)試劑盒 forCentaurinBeta6(CENTb6)
Calicin蛋白(CCIN)檢測(cè)試劑盒 forCalicin(CCIN)
TGFβ誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1(TIEG1)檢測(cè)試劑盒 forTGFBetaInducibleEarlyResponseGene1(TIEG1)
組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)檢測(cè)試劑盒 forTissueInhibitorsOfMetalloproteinase2(TIMP2)
白介素31(IL31)檢測(cè)試劑盒 forInterleukin31(IL31)
線粒體甘油-3-磷酸?；D(zhuǎn)移酶(GPAM)檢測(cè)試劑盒 forGlycerol-3-PhosphateAcyltransferase,Mitochondrial(GPAM)
甘胺酸-N-甲基轉(zhuǎn)移酶(GNMT)檢測(cè)試劑盒 forGlycine-N-Methyltransferase(GNMT)
胱天蛋白酶8(P8)檢測(cè)試劑盒 forCaspase8(P8)
和肽素(CPP)檢測(cè)試劑盒 forCopeptin(CPP)
細(xì)胞凋亡DNA Ladder提取試劑盒(柱式吸附)來(lái)酸溴苯那敏標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:125mg 英文名稱：Brompheniramine Maleate
S-腺苷-L-高半氨酸標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱：S-Adenosyl-L-Homocysteine
托拉唑相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱：
戊酸雌二醇標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱：Estradiol Valerate
二硫化四乙基秋蘭姆標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Disulfiram
內(nèi)酯相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱：
囊素標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Allantoin
芐星頭孢匹林標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱：Cephapirin Benzathine
蒼白松果菊標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱：
吡酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:150mg 英文名稱：Topiramate
