食用菌的菌種生產(chǎn)方法及滅菌設(shè)備!
食用菌的菌種生產(chǎn)方法及滅菌設(shè)備!
食用菌生產(chǎn)上對(duì)培養(yǎng)基常用的滅菌方法為濕熱滅菌( moist heat sterilization),是通過蒸汽殺死微生物的方法。在同一溫度下,濕熱滅菌比干熱滅菌( dry heat strelization)效果好,因?yàn)闈駸釡缇拇┩噶Ρ雀蔁釡缇?,殺傷力?qiáng)。蛋白質(zhì)、原生質(zhì)膠體在濕熱條件下容易變性凝固,酶系統(tǒng)容易被破壞,而且蒸汽進(jìn)入細(xì)胞凝結(jié)成水,放出潛在的熱量而提高了環(huán)境溫度,使殺菌力增強(qiáng)。
一、常用的濕熱滅菌設(shè)備
⒈高壓蒸汽滅菌器(high pressure steam sterilizer) 它是利用濕熱滅菌的一種高效滅菌器,使用方便,應(yīng)用普遍。主要構(gòu)造和功能為:①罐體內(nèi)放瓶(袋)等滅菌物;②壓力表指示鍋內(nèi)壓力及溫度;③排氣閥排除冷凝空氣;④安全閥在超過規(guī)定的壓力時(shí)自動(dòng)放氣降壓。市售的有手提式、立式和臥式三種形式。其中立式分為普通型和自動(dòng)型。手提式和立式的容量較小,一般用于一級(jí)菌種培養(yǎng)基的滅菌;臥式的容量大,用于二級(jí)菌種、三級(jí)菌種培養(yǎng)料的滅菌,熱源可用電、煤氣或直接通蒸汽。另外還有自制高壓滅菌鍋,鍋身由8~10mm鋼板制成,鍋蓋厚1.0~1.5cm,凸起成半圓形,鍋上裝有壓力表、溫度表和安全閥,鍋的容量為可裝800~1000瓶(袋)不等,熱源可用煤、柴等。此外,家用壓力鍋也可用來做一級(jí)菌種培養(yǎng)基的滅菌。
手提式高壓滅菌器
1-提柄;2-壓力表;3-安全閥;4-器蓋;5-器身;6-提環(huán);7-放氣;8-翼狀螺帽;9-橡膠墊圈;10-螺絲;11-金屬軟管;12-圓柱;13-置物筒;14-篩架;15-腳架
立式高壓蒸汽滅菌器
1-放氣開關(guān);2-拉蓋把手;3-架水漏斗;4-加水開關(guān);5-玻璃管上開關(guān);6-玻璃管;7治水標(biāo)志;8玻璃管下開關(guān);9-玻璃管放水開關(guān);10-加熱處;11-壓蓋螺帽;12-壓力表;13,14-安全閥重垂;15-內(nèi)鍋放水開關(guān);16-大扳手
高壓滅菌時(shí)掌握的蒸汽壓力和滅菌時(shí)間,以不同的培養(yǎng)基而定,瓊脂培養(yǎng)基多采用0. 11MPa,121℃,20~30min;固體培養(yǎng)基多采用0.11~0.14MPa,123~128℃,l~1. 5h。袋裝培養(yǎng)基因容量大,滅菌時(shí)間延長(zhǎng)至2h以上。
⒉常壓蒸汽滅菌灶(atmospheric press steam sterilizer) 根據(jù)生產(chǎn)量自制容積適宜的常壓蒸汽滅菌灶,它經(jīng)濟(jì)實(shí)惠、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,可用于二級(jí)菌種、三級(jí)菌種培養(yǎng)料的滅菌。目前,我國(guó)多采用自制的蒸籠或利用鋼板、磚、水泥等砌成大型流通蒸汽滅菌灶進(jìn)行常壓蒸汽滅菌。無論哪種形式,也不論采用哪種材料,常壓蒸汽滅菌灶均要求有較高的密閉性,這樣滅菌效果才能好,又可節(jié)省燃料,密閉性高的,溫度可達(dá)105℃,反之則達(dá)不到100℃。
磚墻時(shí)滅菌灶
1-墻框;2-柵格;3-爐柵;4-煙囪;5-小水鍋;6-水溝
蒸汽通入式滅菌灶
1-支架;2-爐膛;3-水位檢驗(yàn)器;4-熱管;5-盛水器;6-煙囪;7-排氣孔;8-注水管
常壓滅菌的注意事項(xiàng)如下:
①滅菌瓶(袋)在鍋內(nèi)擺放不宜過密,層與層之間要用層屜或菌袋筐分開,便于蒸汽在鍋內(nèi)均勻流通。
②當(dāng)加熱發(fā)生蒸汽時(shí),打開下面的排氣孔,排出冷空氣。當(dāng)有直沖蒸汽排出時(shí),即可關(guān)閉排氣孔,待溫度升到100℃時(shí),開始計(jì)時(shí),連續(xù)保持8h以上,即可殺死耐熱性的芽孢。
③點(diǎn)火加熱前將鍋內(nèi)和預(yù)熱鍋加足水,在滅菌過程中要注意鍋內(nèi)的水位,要隨時(shí)添水,防止燒干鍋。
在滅菌的全過程中,火力應(yīng)按猛攻一恒溫一徐降的過程操作。即開始火宜猛,盡快達(dá)到100℃,時(shí)間為2h左右為宜,防止升溫緩慢,時(shí)間過長(zhǎng),引起原料變酸;當(dāng)溫度升到100℃時(shí),要保持溫度不變,不能時(shí)高時(shí)低影響滅菌效果。當(dāng)?shù)竭_(dá)滅菌溫度后再猛攻一會(huì)兒,然后讓鍋內(nèi)溫度緩緩降低,降至80℃時(shí),方可開門取物。
⒊多功能蒸汽爐 用常壓蒸汽滅菌灶,雖然成本比較低,但滅菌時(shí)間過長(zhǎng),而且出鍋、裝鍋費(fèi)時(shí)費(fèi)力。滅菌時(shí)鍋內(nèi)水位很難控制,水加多了底層菌袋易進(jìn)水,水少了又怕燒干鍋。多功能蒸汽爐具有以下優(yōu)點(diǎn)。
①蒸汽爐體積小,重量輕,一人即可推動(dòng)(帶有移動(dòng)輪),可在裝袋場(chǎng)所就地滅菌,免去料袋裝鍋出鍋之勞苦。
②升溫比較快,容水200L,燒10min即可生成蒸汽。與常壓滅菌灶比較,可節(jié)省燃料40%以上。
③一爐多用,除可對(duì)料袋滅菌外,還可用蒸汽保護(hù)接種、培養(yǎng)料二次發(fā)酵、發(fā)菌室增溫、出菇棚增溫增濕、配制飽和鹽水、廚房做飯燒水等。
蒸汽爐的滅菌溫度介于常壓蒸汽滅菌與高壓蒸汽滅菌之間,一般常壓蒸汽滅菌灶滅菌溫度在80~100℃,高壓鍋在115~128℃,而蒸汽爐滅菌溫度在100~108℃。使用蒸汽爐滅菌,在裝袋場(chǎng)所就近整理地面,鋪一層竹竿、玉米秸或磚,目的是讓菌袋和地面隔離,防止滅菌時(shí)冷凝水浸袋。將料袋累積成梯形或方形,一般8~12層比較好。也可裝筐滅菌,多者一次可料袋滅菌4000個(gè)。擺好料袋后,蓋上兩層塑料布,為了保溫再蓋草簾。用磚或其他重物沿四周將兩層塑料布與草簾壓嚴(yán),以防止蒸汽壓力將覆蓋物掀起。準(zhǔn)備好后將蒸汽爐里的輸氣管插入袋垛底層的竹竿或磚縫隙中,向蒸汽爐內(nèi)加水達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)水位。爐火旺燒8~10min,爐內(nèi)蒸汽壓力可達(dá)0.049MPa,此時(shí)打開排氣閥向料袋堆通放蒸汽,1.5h后料溫可達(dá)100℃以上。多功能蒸汽爐的使用壓力為0.049MPa,超過此壓力時(shí)自動(dòng)放氣,安全可靠。旺火耗煤量為20~26kg/h,?;鹑济?~8kg/h。旺火耗水90kg/h,產(chǎn)汽量為90~120m3/h。當(dāng)料堆中心溫度升至100℃時(shí),繼續(xù)燒8~10h后停火,當(dāng)料堆溫度降至80℃左右時(shí),卸鍋冷卻,溫度降到30℃以下時(shí)開始接種。
二、常用的干熱滅菌設(shè)備常用的干熱滅菌設(shè)備為電熱恒溫干燥箱和鼓風(fēng)干燥箱,食用菌生產(chǎn)上對(duì)一些接種器具和玻璃器皿的滅菌常用干熱滅菌,干熱滅菌不能用于培養(yǎng)基的滅菌。
百歐博偉生物擁有Biolog微生物鑒定系統(tǒng),超低溫冰箱,生物安全柜等儀器設(shè)備可進(jìn)行對(duì)微生物分離、鑒定等常規(guī)的分子實(shí)驗(yàn)研究。對(duì)我國(guó)生命科學(xué)研究、生物技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)業(yè)發(fā)展的需求進(jìn)行積極的面對(duì)社會(huì)乃至國(guó)外收集保藏提供微生物菌種資源。在保證生物安全和保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的前提下,為工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、衛(wèi)生健康、環(huán)境保護(hù)、科研教育提供微生物物種資源、基因資源、信息資源和專業(yè)技術(shù)服務(wù)。