Cellometer K2 Cell Viability Counter 雙熒光細(xì)胞分析儀 雙熒光精確計數(shù),類流式分析功能 ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 【操作步驟】 簡便、友好、快速...... 【技術(shù)特點(diǎn)】 雙熒光和明場成像 細(xì)胞成像 細(xì)胞形態(tài)觀察和活死細(xì)胞計數(shù) 細(xì)胞圖像輸出用于再次分析、報告、發(fā)表 模塊識別軟件 識別成簇細(xì)胞 精確計數(shù)不規(guī)則細(xì)胞 輕松排除細(xì)胞碎片 操作簡便、結(jié)果快速 加樣、計數(shù)、輸出三步式操作 細(xì)胞圖像,計數(shù),大小檢測和活力分析<60s內(nèi) 小樣本量: 僅需15-20 µl 樣本 細(xì)胞濃度范圍廣 明場:細(xì)胞濃度范圍1x105-1x107/mL 熒光:細(xì)胞濃度無限制 選配專業(yè)流式軟件:Denovo FCS Express流式軟件 應(yīng)用 明場細(xì)胞計數(shù)和臺盼藍(lán)細(xì)胞活率檢測; 雙熒光細(xì)胞計數(shù)和AO/PI細(xì)胞活率檢測; 細(xì)胞功能分析:細(xì)胞周期,細(xì)胞凋亡,GFP/RFP轉(zhuǎn)染效率…… 特殊細(xì)胞計數(shù):脆弱的肝細(xì)胞,脂肪細(xì)胞…… 可檢測染料:臺盼藍(lán)/AO/PI/EB/7AAD/Calcein AM/CFDA... 【友好的軟件界面】 符合GMP/GLP軟件;提供IQOQ。 【AO/PI核熒光染料】 雙熒光計數(shù)有核細(xì)胞死活的必要性 1. 明場計數(shù)不能有效區(qū)分有核細(xì)胞和無核細(xì)胞(如紅細(xì)胞,血小板); 2. 臺盼藍(lán)計數(shù)細(xì)胞死活是傳統(tǒng)方法,但是存在各種局限性,無法精確計數(shù)有核細(xì)胞死活。 AO/PI方法 AO(吖啶橙):膜滲透性核染料,可直接進(jìn)入完整的細(xì)胞膜,和核內(nèi)核酸結(jié)合,可以染所有的有核細(xì)胞,發(fā)綠色熒光; PI(碘化丙啶):細(xì)胞核染料,不能通過活細(xì)胞膜,但卻能穿過破損的細(xì)胞膜,在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光。 AO/PI兩種核熒光染料共用:僅染有核細(xì)胞,紅細(xì)胞、血小板等無核細(xì)胞及細(xì)胞碎片可以精確排除在外; 且活的有核細(xì)胞發(fā)綠色熒光,而死的有核細(xì)胞發(fā)紅色熒光, 因此可以精確計數(shù)有核細(xì)胞以及精確計數(shù)有核細(xì)胞活率。 綠色熒光-活細(xì)胞 紅色熒光-死細(xì)胞 【原代細(xì)胞分析】 PBMC,臍血細(xì)胞,骨髓細(xì)胞,干細(xì)胞,原代腫瘤細(xì)胞、肝細(xì)胞等原代細(xì)胞分析 PBMC(紅細(xì)胞少殘留) PBMC(紅細(xì)胞多殘留) 脾細(xì)胞 原代肝細(xì)胞 【應(yīng)用舉例】 PBMC精確計數(shù)和活率分析 紅細(xì)胞殘存對細(xì)胞計數(shù)的影響 樣本#4 樣本#5 樣本#7 樣本#9 樣本#15 樣本#17 小鼠脾臟細(xì)胞的精確計數(shù)和活率分析 骨髓細(xì)胞的精確計數(shù)和活率分析 臍血全血中白細(xì)胞的精確計數(shù)和活率分析 原代肝細(xì)胞計數(shù)和活率分析 【美國nexcelom公司】 細(xì)胞圖像計數(shù)的者; 專注于細(xì)胞計數(shù),又不于細(xì)胞計數(shù); Cellometer品牌不于細(xì)胞計數(shù)、亦可進(jìn)行細(xì)胞活力分析和細(xì)胞功能分析。 【Cellometer品牌家族】 細(xì)胞計數(shù) 儀器原理: 通過明場原理進(jìn)行細(xì)胞計數(shù) 儀器代表: AUTO T4, AUTO 1000, Mini系列細(xì)胞計數(shù)儀 應(yīng)用領(lǐng)域: 適合細(xì)胞系的精確計數(shù) 細(xì)胞活力 儀器原理: 通過雙熒光原理進(jìn)行細(xì)胞活力分析(AO/PI) 儀器代表: AUTO 2000, K2系列細(xì)胞活力分析儀 應(yīng)用領(lǐng)域: 適合原代細(xì)胞的精確計數(shù) 細(xì)胞功能 儀器原理: 通過雙熒光/雙軟件原理進(jìn)行細(xì)胞功能分析 儀器代表: VISION CBA, K2系列細(xì)胞功能分析儀 應(yīng)用領(lǐng)域: 細(xì)胞凋亡/細(xì)胞周期/細(xì)胞GFP&RFP陽性率等分析通過AO/PI或臺盼藍(lán)染活死細(xì)胞
雙熒光通道:Ex/Em: 470nm/535nm; Ex/Em:540nm/660nm
明場計數(shù)(cells/ml) AO/PI計數(shù)(cells/ml) RBC殘留% 9.20X10^6 8.61X10^6 6.4 6.96X10^6 6.80X10^6 1.9 8.69X10^6 8.09X10^6 6.9 8.02X10^6 5.10X10^6 36.4 8.56X10^6 1.99X10^6 76.8 9.41X10^6 3.5X10^6 62.8