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產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 加工定制 | 否 |
---|---|---|---|
適用領(lǐng)域 | 科研 | 貨號 | BJ-PJ6636 |
規(guī)格 | 25T 、100T | 包裝 | 盒 |
用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
全血microRNA提取試劑盒
商品屬性:
產(chǎn)品分類 | 規(guī)格 | 貨號 |
miRNA檢測系列 | 25T | BJ-PJ6636 |
miRNA檢測系列 | 100T | BJ-PJ6636 |
商品介紹:
描述:生產(chǎn)的全血 miRNA 提取試劑盒是目前世界上提 取小 RNA(<200nt)操作步驟重復(fù)性最好、小 RNA 產(chǎn)率最高的方法。使用該試劑盒提取的小 RNA(Small RNA) 中,長度在 15~200nt 范圍的 RNA 在 95%以上,基本不含 有大 RNA 和 DNA。使用該試劑通過一步上柱即可獲得高純 度 miRNA,可在 45min 內(nèi)完成小 RNA 的提取。該試劑盒適 用于凍存和新鮮的抗凝全血樣本(注意該試劑盒不適用于血 清和血漿)。
儲存:室溫可保存 2 年。
使用防護(hù)建議:miRNA Reagent A 溶液中含有胍鹽,其具有強(qiáng)烈的腐蝕性,試驗(yàn)時請務(wù)必佩戴防護(hù)眼鏡、手套、口罩等防護(hù)措施,如有皮膚接觸請立即用大量清水沖洗,再另行就醫(yī)。
自備試劑:異丙醇、乙醇、75%異丙醇
操作方法:
(1) 向 1.5ml EP 管中加入 300μl miRNA Reagent A。將150μl 抗凝全血加入到上述 300μl miRNA Reagent A 中,立即手腕用力震蕩混合均勻。室溫靜置 5min 以充分裂解細(xì)胞。
(2) 向上述裂解完畢的裂解液中加入 250μl miRNA ReagentB,上下顛倒混合均勻。13,000rpm 離心 5min,吸取 550μl上清液,轉(zhuǎn)移到新的 1.5ml EP 管中。
(3) 向上述溶液中加入 200μl 無水乙醇,手腕用力震蕩數(shù)次,室溫放置 5min。
(5) 13,000rpm 離心 10min,轉(zhuǎn)移 700μl 上清液到新的 1.5mlEP 管中。
(6) 向上述溶液中加入 300μl 異丙醇,手腕用力上下顛倒數(shù)次。
(7) 分兩次將上述溶液倒入到 miRNA 吸附柱中,13,000rpm離心 1min,倒掉過濾液。
(8) 向吸附柱中加入700μl 75%異丙醇洗滌一次,13,000rpm離心 1min,倒掉過濾液。
(9) 向吸附柱中加入 500μl 無水乙醇洗滌一次,13,000rpm離心 1min,倒掉過濾液。
(10) 吸附柱 13,000rpm 空離心 2min,去掉殘留的乙醇。
(11) 將吸附柱放入到新 1.5ml EP 管中,室溫放置 2min,使殘留乙醇揮發(fā)。在吸附柱濾芯上加入 30μl RnaseFree TEBuffer,室溫靜置 2min,13,000rpm 離心 2min,洗脫產(chǎn)物即為提取的 miRNA。。
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