當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗原理>> 48T/96TATA人抗滋養(yǎng)膜細(xì)胞抗體ELISA試劑盒實(shí)驗原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | ATA人抗滋養(yǎng)膜細(xì)胞抗體ELISA試劑盒實(shí)驗原理 |
英文名稱 | Human anti-trophoblast antibody, ATA Elisa Kit |
貨號 | FS-H64157 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實(shí)驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
色素c氧化酶6抗體英文全稱Tolloid Like Protein 1英文簡稱TLL1 檢測范圍:2862nmol/L-40ng/ml
色素c氧化酶5A抗體英文全稱enteric adenovirus英文簡稱EAd 檢測范圍:1954nmol/L-
色素c氧化酶1抗體英文全稱myelin oligodendrocyte glycoprotein antibody英文簡稱MOG-Ab 檢測范圍:1660nmol/L-32ng/ml
色素c氧化酶10抗體英文全稱199P-tau英文簡稱199P-tau 檢測范圍:2532nmol/L-2000pg/mL
色素C抗體英文全稱West Nile Virus IgM英文簡稱WNV-IgM 檢測范圍:2670nmol/L-
色素CYP3A抗體英文全稱TPPA英文簡稱TPPA 檢測范圍:1350nmol/L-
色素CYP2D1抗體英文全稱Carnitine palmityl transferase英文簡稱CPT 檢測范圍:1646nmol/L-8ng/mL
色素CPA6抗體英文全稱OVX1英文簡稱OVX1 檢測范圍:1349nmol/L-200U/ml
Isovanillin 規(guī)格:>98%,BR 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白15抗體
Isovanillin 規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 慢性淋巴白血病缺失基因6蛋白抗體
Itaconicacid 規(guī)格:>98%,BR 13號染色體開放閱讀框38抗體
Jenner'sstain 規(guī)格:BS 14號染色體開放閱讀框140抗體
KT-5823 規(guī)格:>97%(HPLC),BC 15號染色體開放閱讀框52抗體
L(-)-Arabitol 規(guī)格:>98%,BR 15號染色體開放閱讀框41抗體
L-(-)DBTA,Dibenzoyl-L-tartaricacid,monohydrate 規(guī)格:>98%,BR 15號染色體開放閱讀框62抗體
Lactobionicacid 規(guī)格:>98%,BC 視錐感光環(huán)磷鳥苷門控通道蛋白CNG3抗體
L-Aminoacidoxidase>4U/mg 規(guī)格:BC 環(huán)磷鳥苷門控通道蛋白CNG4抗體
游離狀腺激素(FT4)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: FT4 ELISA Kit
胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA檢測試劑盒HumanCaspase-9,Casp-9ELISAKit 96T/48T
白介素1α(IL-1α)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rat Ierleukin 1α ,IL-1α ELISA kit
CLIAKitfoCCC5b-9ELISAKit末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9規(guī)格:48T/96T
體hMLH1基因基化檢測試劑盒20次
ELISAKitAAA抗肌動蛋白抗體規(guī)格:48T/96T
apelin 36(AP36)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔基質(zhì)衍生因子-1(SDF-1/CXCL12)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rabbit somal cell derived factor 1,SDF-1/CXCL12 ELISA kit
潑尼松龍(PS)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: PS ELISA Kit
RabbitLeptospiraIgG,LepIgG酶聯(lián)免疫試劑盒兔鉤端螺旋體IgG(LepIgG)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-Ab酶聯(lián)免疫試劑盒抗?fàn)钕龠^氧化物酶抗體(TPO-Ab)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumancoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISAKit凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
ATA人抗滋養(yǎng)膜細(xì)胞抗體ELISA試劑盒實(shí)驗原理LAMA3/Laminin 5 alpha 3/FITC 熒光素標(biāo)記層粘蛋白α3抗體IgG表面趨化因子受體2抗體五酐Porcine PRL (Prolactin) ELISA Kit
LAP18/stathmin/FITC 熒光素標(biāo)記白血病相關(guān)蛋白18/癌蛋白18抗體IgG表面趨化因子受體3抗體鉻變素FBPorcine ANP (Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit
Phospho-Stathmin (Ser16) /FITC 熒光素標(biāo)記磷化原癌基因蛋白18抗體IgG表面趨化因子受體4抗體N-Z-L-Homoserine lactonePorcine BNP (Brain Natriuretic Peptide) ELISA Kit
Phospho-Stathmin (Ser38)/FITC 熒光素標(biāo)記磷化原癌基因蛋白18抗體IgG活化半胱胺蛋白酶蛋白-3抗體N-Z-L-Homoserine lactonePorcine FN (Fibronectin) ELISA Kit
LAT/FITC 熒光素標(biāo)記T活化連接蛋白抗體IgG抗Ⅵ型膠原抗體PCB No.30Porcine DPT (Dermatopontin) ELISA Kit
Phospho-LAT (Tyr171) /FITC 熒光素標(biāo)記磷化T活化連接蛋白抗體IgG半胱氨蛋白酶8抗體丁基羅丹明BPorcine CFP (Complement Factor P) ELISA Kit
Phospho-LAT (Tyr191) /FITC 熒光素標(biāo)記磷化T活化連接蛋白抗體IgG信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基8抗體Pemetrexed disodium hydratePorcine CFTR (Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator) ELISA Kit
LATS1/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤抑制基因LATS1抗體IgG表面趨化因子受體10抗體硝鐿Porcine TDGF1 (Teratocarcinoma Derived Growth Factor 1) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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