ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢(xún)服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類(lèi)型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。VacA ELISA Kit 核糖體合成蛋白BOP1抗體

PEB1 ELISA Kit 調(diào)節(jié)中心體分離早期相關(guān)激酶BORA抗體
klebsiella ELISA Kit 萊姆病螺旋體抗體
CC16 ELISA Kit 成熟相關(guān)蛋白BOULE抗體
sTfR ELISA Kit 伸長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白抗體
sTweak ELISA Kit 睪丸特異性堿性蛋白Y2抗體
sTRAIL ELISA Kit 乳腺癌易感基因2相關(guān)蛋白抗體
sTNF-R2 ELISA Kit 磷酸化乳腺癌易感基因1抗體
sTNFαR ELISA Kit 磷酸化乳腺癌易感基因1抗體
Sam ELISA Kit 磷酸化上皮鈣粘附分子抗體
sPECAM-1/sCD31 ELISA Kit 磷酸化乳腺癌易感基因1抗體
SFMC ELISA Kit BRD2蛋白抗體
sVCAM-1 ELISA Kit BRD3蛋白抗體
sEPCR ELISA Kit 磷酸化酪氨酸蛋白激酶6/乳腺腫瘤激酶抗體
VEGFR-2/sFLK-1 ELISA Kit 磷酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗體
sVEGF R1 ELISA Kit 磷酸化EGF應(yīng)答因子1抗體
TK1 ELISA Kit β細(xì)胞素抗體
sAC ELISA Kit 磷酸化BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體
sCKR ELISA Kit ARF鳥(niǎo)苷酸交換因子BIG1抗體
sICAM-1 ELISA Kit 腦特異性同源蛋白BSX抗體
sTREM-1 ELISA Kit 鋅指蛋白47抗體
sLR ELISA Kit BTBD14A蛋白抗體
sLOX-1 ELISA Kit 鋅指蛋白851抗體
sPL-A2 ELISA Kit 嗜乳脂蛋白2亞型A1抗體
SMRP ELISA Kit 磷酸化c-fos抗體
sMHC-1 ELISA Kit 磷酸化c-fos抗體
sRANKL ELISA Kit 磷酸化原癌基因c-Jun抗體
sRANK ELISA Kit 磷酸化原癌基因c-kit抗體
sFASL ELISA Kit 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框148抗體
sAPPα ELISA Kit 細(xì)胞毒性T細(xì)胞抗原抗體-4抗體
sp185/HER-2 ELISA Kit 鈣調(diào)素調(diào)節(jié)蛋白相關(guān)蛋白抗體
sELAF ELISA Kit 緊密連接蛋白1抗體
Lgals3 ELISA Kit 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框149抗體
sHLA-G ELISA Kit 磷酸化原癌基因c-kit抗體
sIL-7R ELISA Kit 磷酸化原癌基因c-kit抗體
sP-selectin ELISA Kit 磷酸化淋巴細(xì)胞衍生C-型凝集素抗體
sOX40L ELISA Kit 2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框39抗體
sE-selectin ELISA Kit 2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框49抗體
sENG/sCD105 ELISA Kit 2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框50抗體
B7-2/sCD86 ELISA Kit 科凱恩氏綜合癥相關(guān)蛋白/早衰蛋白CSA抗體
sCD44-v9 ELISA Kit 磷酸化細(xì)胞角蛋白8抗體
sCD40L ELISA Kit 磷酸化細(xì)胞角蛋白8抗體
sCD38 ELISA Kit 磷酸化細(xì)胞角蛋白18抗體
sCD30L ELISA Kit 胞粘蛋白2抗體
sCD28 ELISA Kit 細(xì)胞色素CPA6抗體
sCD276/sB7-H3 ELISA Kit 細(xì)胞色素CYP3A抗體
CR2/sCD21 ELISA Kit 細(xì)胞色素cP450 CYP20A1抗體
sCD163 ELISA Kit 細(xì)胞色素cP4501B1抗體

HBcAb(IgM)  乙型肝炎核心抗體 IgM  96T
LH  促黃體生成素  96T
FSH  促卵泡生成素  96T
PLH  催乳素  96T
P  孕酮  96T
FT4  游離T4  96T
T3  三碘甲狀腺原氨酸（T3）  96T
Mouse serine/threonine protein kinase,STK ELISA Kit  小鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶  96T
G-CSF (Rabbit Granulocyte Colony Stimulating Factor) ELISA Kit  兔粒細(xì)胞集落刺激因子  96T
JNK (Rat c-Jun N-terminal kinases,JNK) ELISA Kit  大鼠c-Jun氨基末端激酶  96T
Fc GammaR II /CD32(Human Receptor II for the Fc region of immunoglobulin G,Fc GammaR II ) ELISA Kit  人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ  96T
MHC ELISA Kit  魚(yú)類(lèi)主要組織相容性復(fù)合體  96T
T4  甲狀腺素（T4）  96T
TSH  人血清促甲狀腺素（TSH）  96T
Anti-TG  甲狀腺球蛋白抗體（TG抗體）  96T
Anti-TM  甲狀腺微粒體抗體(TM抗體)  96T
AFP  甲胎蛋白定量(一/二步夾心法)　  96T
AFP  甲胎蛋白定性  96T
CEA  癌胚抗原定量　  96T
CEA  癌胚抗原定性(一/二步夾心法)  96T
Ferritin  鐵蛋白  96T
Beta2-MG  β2-微球蛋白  96T
PSA  前列腺特異性抗原  96T
CA50  上皮類(lèi)癌相關(guān)抗原  96T
CA125  卵巢癌相關(guān)抗原  96T
CA153  乳腺癌相關(guān)抗原  96T
CA199  胰腺癌相關(guān)抗原  96T
CMV  巨細(xì)胞病毒 IgG(間接法二步法)  
CMV  巨細(xì)胞病毒 IgM(間接法二步法)  
CMV  巨細(xì)胞病毒 IgM(捕獲法一步法)  
CMV IgM  巨細(xì)胞病毒 IgM(捕獲法二步法)  
RV  風(fēng)疹胞病毒 IgG(間接法二步法)  
RV IgM  風(fēng)疹胞病毒 IgM(間接法二步法)  
RV IgM  風(fēng)疹病毒 IgM(捕獲法一步法)  
Mouse Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA Kit  小鼠乳酸脫氫酶  96T
MHB(Rat Methemoglobin,MHB) ELISA Kit  大鼠高鐵血紅蛋白  96T
Fc GammaR I /CD64(Human Receptor I for the Fc region of immunoglobulin G,Fc GammaR I ) ELISA Kit  人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ  96T
C3 ELISA Kit  鮭魚(yú)補(bǔ)體蛋白3  96T
Alpha2-AP (Rabbit Alpha2-Antiplasmin) ELISA Kit  兔子α2抗纖溶酶  96T
RV IgM  風(fēng)疹胞病毒 IgM(捕獲法二步法)  
TOXO IgG  弓形蟲(chóng)抗體 IgG(間接法二步法)  
TOXO IgM  弓形蟲(chóng)抗體 IgM(間接法二步法)  
TOXO IgM  弓形蟲(chóng)抗體 IgM(捕獲法一步法)  
TOXO IgM  弓形蟲(chóng)抗體 IgM(捕獲法二步法)  
HSV- I IgG  單純皰疹Ⅰ型病毒 IgG(間接法二步法)  
HSV- I IgM  單純皰疹Ⅰ型病毒 IgM(間接法二步法)  
HSV- I IgM  單純皰疹Ⅰ型病毒 IgM（捕獲法一步法）  
HSV- I IgM  單純皰疹Ⅰ型病毒 IgM（捕獲法二步法）  
HSV- II IgG  單純皰疹Ⅱ型病毒 IgG(間接法二步法)  
HSV- II IgM  單純皰疹Ⅱ型病毒 IgM(間接法二步法)  
HSV- II IgM  單純皰疹Ⅱ型病毒 IgM （捕獲法，一步法）  
HSV- II IgM  單純皰疹Ⅱ型病毒 IgM （捕獲法，二步法）  
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理Anti-Ins  胰島素抗體（間接法二步法）  96T
Anti-GAD  谷氨酸脫羧酶抗體（間接法二步法）  96T
Ins  胰島素（間接法二步法）  96T
C-Peptide  C-肽（夾心法二步法）  96T
  破傷風(fēng)抗體（雙抗原夾心法）  96T
  包蟲(chóng)抗體IgG（間接法二步法） 
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿(mǎn)板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)