蘇木素伊紅染色試劑盒-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號	FS-X9841

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

中文名稱：蘇木素伊紅染色試劑盒

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：200ml

貨號：FS-X9841

產(chǎn)品介紹:

蘇木素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色，簡稱HE染色，是病理學(xué)常規(guī)制片中基本的染色方法，應(yīng)用極其廣泛。蘇是從原產(chǎn)中南美的洋蘇木中提取出來的淺黃褐色的結(jié)晶，是一種堿性染色劑，它在被氧化后生成蘇木素，同媒染劑(常用的是三價的鋁或鹽鐵)一起使用，能夠使細(xì)胞核染色。

蘇木素染色液是采用進(jìn)口的高純度蘇、氧化劑等優(yōu)質(zhì)試劑原料和經(jīng)典配方配制，染色液內(nèi)不使用汞、甲醇等有毒試劑，其特點(diǎn)是不易產(chǎn)生沉淀和金屬; 應(yīng)用范圍廣，可以用于人、動物、畜牧、水產(chǎn)等領(lǐng)域，用于組織切片或培養(yǎng)細(xì)胞的染色。蘇木素染色液染色后細(xì)胞核呈藍(lán)紫色。本染色液可以重復(fù)使用，直至效果不佳時再換用新的染色液。

伊紅染色液是采用優(yōu)質(zhì)試劑原料和經(jīng)典配方配制，用于組織切片或培養(yǎng)細(xì)胞的染色。伊紅染色液染色后細(xì)胞漿呈粉紅色或紅色。本染色液可以重復(fù)使用，直至效果不佳時再換用新的染色液。

儲存條件：室溫避光保存。

有效期：一年。

實(shí)驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

磺倍他司汀英文名： Finasteride后期促進(jìn)復(fù)合蛋白3抗體包裝25g

磺多沙唑英文名： Fleroxacin磷化CRK抗體包裝5g

磺酚妥拉明英文名： Fleroxacin鈣粘蛋白6抗體包裝1g

磺依普羅沙坦;依普沙坦英文名： Flucytosine鈣粘蛋白23抗體包裝250mg

基多巴英文名： Flucytosine小腦變性相關(guān)蛋白2抗體包裝1g

美托洛爾英文名： Flurbiprofen分裂周期2相關(guān)蛋白激7抗體包裝5g

普利英文名： FlurbiprofenA型產(chǎn)氣莢膜梭菌(魏氏梭菌)包裝100mg

拉羅皮蘭,MK0524英文名： Flurbiprofen磷化角蛋白18抗體包裝50mg

西地平英文名： Fosfomycin Calcium胞嘧啶脫抗體包裝10g

諾普利英文名： Fosfomycin sodiumC2GNT3蛋白抗體包裝250g

樂卡地平鹽鹽英文名： Gatifloxacin磷化原癌基因c-Jun抗體包裝50g

普利英文名： Gatifloxacin磷化原癌基因c-Jun抗體包裝100g

雷諾英文名： Gefitinib腫瘤標(biāo)志物CYFRA21-1抗體包裝500g

利奧西呱，BAY 63-2521英文名： Gefitinib磷化原癌基因c-Jun抗體包裝100g

貝丁酯;貝特英文名： Gemcitabine HCl周期A1蛋白抗體包裝1ml

鮑曼不動桿菌Acinetobacter│baumannii 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR葉受體α試劑盒23-乙酰澤瀉B;Alisol B 2

亮白曲霉Aspergillus│candidus 質(zhì)量規(guī)格：>99%葉試劑盒鹽小檗堿; Berberine hyd

米曲霉Aspergillus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品氧還原蛋白過氧化物4試劑盒異補(bǔ)骨脂;Isopsoralen
蘇木素伊紅染色試劑盒貴州綠僵 2,2′,4,4′,5,5′-六聯(lián)苯鈣蛋白1

土曲霉 3,5-二苯甲美麗線蟲凋亡基因

溜曲霉 3-芐氨基己內(nèi)酰保護(hù)

尖枝革 3,4-二聯(lián)苯S100鈣結(jié)合蛋白A6

短鏈諾卡氏 10-順-十七碳烯線粒體核糖體蛋白L41

赤曲霉磺多辛金屬硫蛋白2

臭紅菇 2-噻唑-5-甲CD5分子樣蛋白

Pseudomonas fluorescens PfO-1 二十四烷甲酯血小板型磷果糖激

成團(tuán)泛鹽甲苯噻葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白-94

枯草芽孢桿位十二內(nèi)酯S100鈣結(jié)合蛋白PBP

放射形根瘤特布他林半硫鹽14-3-3蛋白

谷棒桿Ⅲ型 4-溴-3-苯鈣激活中性蛋白1

中慢生華癸根瘤 2,3-二-6-氟苯甲琥珀脫氫1-1

庫爾勒海洋桿苯并(k)熒蒽抑絲蛋白1

香菇苯并(b)螢蒽C4BPA
操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)