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貨號	FS-X9837

產(chǎn)品介紹:

Rhodamine 123染色液可用于細(xì)胞凋亡檢測，Rhodamine 123 是一種細(xì)胞通透性的、陽離子的熒光探針，容易被有活性的線粒體攝取，沒有細(xì)胞毒性，Rhodamine 123由于帶陽離子所以當(dāng)線粒體膜電位存在的時候就會透過細(xì)胞膜在活細(xì)胞的線粒體內(nèi)聚集，發(fā)出黃綠色熒光，而當(dāng)膜電位下降的時候，聚集的Rhodamine 123 就減少，從而發(fā)光強(qiáng)度降低。

Rhodamine 123 常與Cy5和AMCA (Aminomethylcoumarin Acetate)等組合進(jìn)行多色熒光分析,相互間無顏色交叉;分析細(xì)胞凋亡時,可用Rhodamine 123 來檢測線粒體的膜電位,而用NAO 來檢測線粒體結(jié)構(gòu)的完整性。Rhodamine 123，可用于對許多種細(xì)胞進(jìn)行染色，包括植物細(xì)胞和細(xì)菌。由于細(xì)胞內(nèi)ATP的量與Rhodamine 123的熒光強(qiáng)度之間有相關(guān)性，Rhodamine也可應(yīng)用于檢測細(xì)胞內(nèi)的ATP。

儲存條件：4℃避光保存。長期保存-20℃避光保存。

有效期：六個月。

中文名稱：Rhodamine 123染色液

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：100T

貨號：FS-X9837

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

英文名： Cyclosporine A磷化原癌基因c-kit抗體包裝5g

拓?fù)涮婵蝶}鹽英文名： Ticlopidine HCl磷化原癌基因c-kit抗體包裝5g

維酰酚英文名： Ticlopidine HCl胸腺基質(zhì)淋巴生成受體抗體包裝25g

維羅非尼,RG7204英文名： Cytarabine磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝5g

戊柔比星英文名： Cytarabine磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝1g

西地尼布;AZD2171英文名： Cytarabine蛋白磷激PKC/CPI-17抗體包裝5g

西地尼布馬來鹽英文名： Dacarbazine磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝1g

亞葉鈣英文名： Dacarbazine磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝1g

鹽阿糖胞英文名： Dasatinib胰輔脂抗體包裝5g

鹽埃羅替尼英文名： Dasatinib19號染色體開放閱讀框45抗體包裝5MG

鹽昂丹司瓊英文名： Daptomycin過氧化氫誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體包裝5MG

鹽達(dá)莫司汀英文名： Daptomycin核因子NFκB激活蛋白1抗體包裝100g

鹽表阿霉英文名： Daunorubicin HCl第12號染色體開放閱讀框23抗體包裝25g

鹽/鹽阿霉英文名： Daunorubicin HClγ-連環(huán)/連接蛋白γ抗體包裝5g

鹽英文名： Daunorubicin HCl10號染色體開放閱讀框4抗體包裝100g

鏈霉菌屬Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：含量測定胰島受體底物2試劑盒鹽拓?fù)涮婵?Topotecan hyd

膠孢Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%胰島受體底物1試劑盒延齡草;Diosgenin gluco

小珊瑚球菌Corallococcus│exiguus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99.0%,標(biāo)準(zhǔn)品胰島受體β試劑盒異槲皮;Isoquercitrin
Rhodamine 123染色液山羊葡萄球新生牛血清500ml/XQ-A0500磷化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD-2

克魯斯假絲酵母新生牛血清100ml/XQ-A0100磷化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD-7

泡盛曲霉新生牛血清50ml/XQ-A0050核糖基轉(zhuǎn)移1

薄層穩(wěn)定劑，500ml裝/CT-0500脂聯(lián)β樣1

釀酒酵母穩(wěn)定劑，200ml裝/CT-0200胰島抗體

穩(wěn)定劑，50ml裝/CT-0050神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白4

仙芝(靈芝屬之一種) 穩(wěn)定劑，10ml裝/CT-0010血管緊張轉(zhuǎn)化1

香菇蛋白/穩(wěn)定劑/PS-050血管緊張轉(zhuǎn)化1

嗜鹽細(xì)屬蛋白/穩(wěn)定劑/PS-010流行性出血熱IgG抗體

短小克銀漢霉蛋白/穩(wěn)定劑/PS-00115-deoxy-前列腺J2

傷門氏粘附液/301-026-015抗能受體M2抗體

干草鞘氨單胞粘附液/301-025-015CD64分子

黃桿蛋白膠染液 /300-692-1000磷乙磷

假單胞屬蛋白膠染液 /300-692-500p38絲裂原活化蛋白激

天青鏈霉 AquaSafe 安全保鮮劑/22-100-01神經(jīng)肽S

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