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精子形態(tài)學(xué)染色液(巴氏法)

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 14:08:00瀏覽次數(shù):132次

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貨號 FS-X9932
精子形態(tài)學(xué)染色液(巴氏法)正在熱銷的產(chǎn)品:Nrn1/Cpg15/Neuritin 轉(zhuǎn)化神經(jīng)突起蛋白抗體四丁硫氫 98%
Neurocan 神經(jīng)粘蛋白抗體四丁硫氫 離子對色譜
NGB 腦紅蛋白/神經(jīng)血紅蛋白抗體四丁溴化 98%
NeuroD1 神經(jīng)元分化因子1抗體三鹽鹽 for HPLC, ≥99.0%
Neurofascin/Nfasc155 神經(jīng)束蛋白-155三鹽鹽 99%
NT 神

中文名稱:精子形態(tài)學(xué)染色液(巴氏法)

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:4×20ml|4×100ml|4×500ml

貨號:FS-X9932

產(chǎn)品介紹:

用途:

用于精子形態(tài)分析,評估畸形率

注意事項:

本染色方法系WHO推薦Diff-Quik染色法,因精子及細(xì)胞內(nèi)不同等電點的蛋白質(zhì)在相同的酸度下帶不同的電荷,能選擇性地結(jié)合相應(yīng)的染料而著色。

儲存條件:室溫,12個月

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

淡紫灰鏈霉菌骨架銜接蛋白BIN3抗體Human GEF-H1 小鼠opiorphin 免疫試劑盒

假絲酵母屬雙向染色體分裂蛋白1抗體Human GDPD5 小鼠N-乙?;?絲酰-天門冬酰-賴酰-脯(AcSDKP)免疫試劑盒

產(chǎn)氣莢膜梭菌 D型轉(zhuǎn)錄因子Brn3蛋白抗體Brn3αHuman GFPT1 小鼠N-乙酰-β-D-基葡萄糖(NAG)免疫試劑盒

泡盛曲霉骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體Human GDPD2 小鼠N端前腦鈉(NT-proBNP)免疫試劑盒

磚紅鐮孢菌腦鈉抗體Human GEFT 小鼠NANOG同源域蛋白(NANOG)免疫試劑盒

猴假單胞菌骨形態(tài)發(fā)生蛋白3抗體Human GEM 小鼠NAD依賴性蛋白脫乙酰sirtuin-1(SIRT1)免疫試劑盒

毛柄金錢菌(金針菇)抑凋亡基因bag1抗體Human GEMIN5 小鼠NADPH氧化1(NOX1)免疫試劑盒

阿魏側(cè)耳蛙皮受體3抗體Human GEMIN4 小鼠M型肌激(CKM)免疫試劑盒

大豆慢生根瘤菌骨形態(tài)發(fā)生蛋白8抗體Human GEMIN6 小鼠MAP激活化蛋白激2(MAPKAPK2)免疫試劑盒

牡丹擬盤多毛孢菌骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體Human GEMIN7 小鼠L選擇(L-Selectin/CD62L)免疫試劑盒

黑曲霉磷化Bcl-2抗體Human GEMIN4 小鼠L-乳脫氫A鏈(LDH-A)免疫試劑盒

植物乳桿菌磷化Bcl-2抗體Human GDAP2 小鼠L解(PAL)免疫試劑盒

谷棒桿菌磷化Bcl-xL蛋白抗體Human GDAP1L1 小鼠Klotho 免疫試劑盒

大腸埃希氏菌神經(jīng)母瘤相關(guān)蛋白ARID3B抗體Human GDE1 小鼠KI-67抗原(MKI67)免疫試劑盒

凍干粉  產(chǎn)腸大腸埃希氏菌(陽性) 微管蛋白β4抗體Human GDAP1L1 小鼠I型膠原蛋白免疫試劑盒

光滑青霉霍亂腸β鏈抗體Human GBP4 小鼠III型前膠原基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒

考克氏菌Kocuria│sp. 質(zhì)量規(guī)格:BRβ2糖蛋白試劑盒芹糖異甘草

匍枝根霉Rhizopus│stolonifer 質(zhì)量規(guī)格:BRβ1腎上腺能受體試劑盒芹菜-7-0-(2G-鼠李糖)龍膽糖

土曲霉原變種Aspergillus│terreus var. terreus 質(zhì)量規(guī)格:>98% (HPLC),BCβ1,4-N-乙?;肴樘寝D(zhuǎn)移2試劑盒5-羥色
精子形態(tài)學(xué)染色液(巴氏法)葉生布勒擔(dān)子酵母 雜氮雙環(huán)磷酯葡糖氨基聚糖

谷棒桿 3-乙?;?6-咪唑并[1,2-B]噠多配體聚糖-1

大腸埃希氏 抗氧劑 LK-1081Ras三磷鳥激活樣蛋白

柔嫩艾美耳球蟲 2--4-肼血管抑

Methylobacterium variabile 3-乙氧基苯吡啶并林

金耳 2,3-二甲氧基磷脂酰肌抗體

DB (彌漫大B瘤) (通過STR鑒定) 8-氨基-6-甲氧基喹啉抗磷脂酰絲凝血原復(fù)合物IgG抗體

炭疽芽胞桿 聚乙烯肉桂酯抗磷脂酰絲凝血原復(fù)合物IgM抗體

*蛹蟲草 肉堿富馬鹽凝血IgG抗體

離中不粘柄 3--5-氟芐凝血IgM抗體

海洋沉積物芽孢桿 3,5-二氟苯布魯氏桿IgG抗體

彎曲假單胞 N-甲基-3-氟芐布魯氏桿IgM抗體

果生鏈核盤 (3S,4S)-1-芐基吡咯烷-3,4-二布魯氏桿IgA抗體

芽胞桿 2-羥基-2-甲基-N-[4-基--3-(三氟甲基)苯基]-3-[4-(氟苯基)硫]酰B瘤因子3

生黑鏈霉 1,2-環(huán)氧-2-甲基-N-[4-基--3-(三氟甲基)苯基]-烯酰肝配蛋白A1

 


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