當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TFN人纖連蛋白ELISA試劑盒實驗原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | FN人纖連蛋白ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Fibronectin, FN Elisa Kit |
貨號 | FS-H63450 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
Arthrinium│phaeospermum (Corda) M.B. Ellis 暗孢節(jié)菱孢Arthrinium│phaeospermum (Corda) M.B. Ellis分離基物:枯死竹子斜面培養(yǎng)物模式菌株:no14生長條件:26存儲條件:定期移植法 純度:97%
Acremonium│strictum W. Gams 直立枝孢Acremonium│strictum W. Gams分離基物:洋玉蘭落葉葉片斜面培養(yǎng)物模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:97%
Valsa│mali Migabe & G. Yamada 蘋果黑腐皮殼Valsa│mali Migabe & G. Yamada分離基物:蘋果斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98%
Pseudocercospora│destructiva (Ravenel) Y.L. Guo & X.J. Liu 壞損假尾孢Pseudocercospora│destructiva (Ravenel) Y.L. Guo & X.J. Liu分離基物:大葉黃楊葉片斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98%
Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 圍叢殼菌Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk分離基物:木欖斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98%
Fusicladium│tremulae 山楊黑星孢Fusicladium│tremulae分離基物:楊樹葉片斜面培養(yǎng)物模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98%
Dothiorella│sp. 殼菌Dothiorella│sp.分離基物:枝干斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98%
Colletotrichum│crassipes (Speg.) Arx 殼皮Colletotrichum│crassipes (Speg.) Arx分離基物:葉片斜面培養(yǎng)物模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98%
FN人纖連蛋白ELISA試劑盒實驗原理CXCR1/IL-8RA 表面趨化因子受體1抗體人參皂苷Rg3PrucaloprideHuman BRCA1 (Breast Cancer Susceptibility Protein 1) ELISA Kit
CXCR2/CD182 表面趨化因子受體2抗體苦參6,7-二甲氧乙氧基喹唑啉-4-Human BRCA2 (Breast Cancer Susceptibility Protein 2) ELISA Kit
CX3CL1 CX3CL1抗體鵝去氧膽3,6-二溴噠Human BCAN (Brevican) ELISA Kit
CX3CR1 趨化因子受體1抗體天麻素3,6-二溴噠Human MT1M (Metallothionein 1M) ELISA Kit
CXorf36 脫羧酶蛋白體36抗體梓Tris(6,6,7,7,8,8,8-heptafluoro-2,2-dimethyl-3,5-octanedionate)erbium(III),Er(FOD)3Human βTG (Thromboglobulin, Beta) ELISA Kit
CXorf36 脫羧酶蛋白體36抗體原兒茶Tris(6,6,7,7,8,8,8-heptafluoro-2,2-dimethyl-3,5-octanedionate)erbium(III),Er(FOD)3Human MT3 (Metallothionein 3) ELISA Kit
Cyclin A 周期素A抗體原兒茶1,2-二(二甲硅基)苯Human CNP (C-type Natriuretic Peptide) ELISA Kit
Cyclin B1 周期素B1抗體血竭素高鹽1,2-二(二甲硅基)苯Human C1q-Ab (Anti-Complement 1q Antibody) ELISA Kit
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