產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱：小鼠胚胎成骨細胞    

產(chǎn)品英文：MC3T3-E1

貨號：FS-01X9675

細胞培養(yǎng)條件：MEMα+10%FBS+1%P/S  

生長狀態(tài)：貼壁生長

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

是否提供細胞STR鑒定：不提供STR鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）37

運輸溫度（℃）：常溫   

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人抗軟骨抗體(anti-cartilage-Ab)ELISA試劑盒 Human anti-cartilage-antibody ELISA Kit

人抗人絨毛膜促性腺抗體(AhCGAb)ELISA試劑盒 Human anti-chorionic gonadotropin-antibody,AhCGAb ELISA Kit

人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)ELISA試劑盒 Human anti-chorionic gonadotropin-antibody,AhCGAb ELISA Kit

人抗腦組織抗體(ABAb)ELISA試劑盒 Human anti-brain tissue antibody,ABAb ELISA Kit

人抗麥膠蛋白/麥溶蛋白抗體(AGA)ELISA試劑盒 Human anti-gliadin antibody,AGA ELISA Kit

人抗磷脂?？贵w(APSA)ELISA試劑盒 Human Anti-phosphatidyl serine antibody,APSA ELISA Kit

人抗磷壁抗體(TA)ELISA試劑盒 Human anti-teichoic acid antibody,TA ELISA Kit

人抗淋巴細胞毒抗體(ALA/LCA)ELISA試劑盒 Human anti-lymphocytotoxic antibody,ALA/LCA ELISA Kit

人抗巨噬細胞抗體(anti-macrophage Ab)ELISA試劑盒 Human anti-macrophage antibody ELISA Kit

人抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒 Human anti-Thyroid-Peroxidase antibody,TPO-Ab ELISA Kit

人抗紅細胞抗體(RBC)ELISA試劑盒 Human anti-red cell antibody ELISA Kit

人28S抗核糖體抗體(28S rRNP)ELISA試劑盒 Human 28S ribosome RNP antibody,28S rRNP ELISA Kit

人抗核仁抗體(ANA)ELISA試劑盒 Human anti-nucleolus antibody,ANA ELISA Kit

人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA試劑盒 Human Anti-glucoprotein 210,GP210 ELISA Kit

人抗肝細胞胞質(zhì)1型抗體(LC1)ELISA試劑盒 Human anti-liver cytosolantibody type 1,LC1 ELISA Kit

人抗肺泡基底膜抗體(ABM-Ab)ELISA試劑盒 Human alveoli basement membrane zone antibody,ABM-Ab ELISA Kit

人抗胸腺細胞球蛋白(ATG)ELISA試劑盒 Human anti-thymocyte globulin,ATG ELISA Kit

人抗表皮細胞基底膜抗體(EBMZ)ELISA試劑盒 Human epidermal basement membrane zone,EBMZ ELISA Kit

人抗浦肯野細胞抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)ELISA試劑盒 Human purkinje cell autoantibody,PCA-1/Yo ELISA Kit
小鼠胚胎成骨細胞pig cholerae salmonella  豬霍亂沙門氏菌抗體 0.2ml

Duck salmonella  鴨沙門氏菌抗體 0.2ml

USP3  去泛化3抗體 0.2ml

ATXN3L  小腦脊髓共濟失調(diào)蛋白3抗體 0.2ml

Endomucin  內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體 0.2ml

KLK3/Prostate Specific Antigen  3/舒血管3抗體 0.2ml

H5N1-H5  H5亞型全病毒抗體 0.1ml

Newcastle disease virus  雞新城疫疫苗（雞瘟4型混合病毒）抗體 1ml