當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>三羧酸循環(huán)系列>> PDH丙酮酸脫氫酶檢測試劑盒可見分光光度法
貨號 | FS-01S63464 |
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商品介紹:
測定意義 PDH(EC 4.1.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,是丙酮酸脫氫酶復合體(PDHC)催化丙酮酸氧化脫羧的限速酶,催化丙酮酸脫梭生成乙基-TPP,把糖酵解和三羧酸循環(huán)連接起來。 測定原理 PDH催化丙酮酸脫氫,同時還原WST-8產(chǎn)生黃色物質,從而導致450nm光吸收的增加。 可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒,質量信得過產(chǎn)品,售后完善。服務于高校及免疫學科研單位,竭誠為您提供更周到的服務更優(yōu)質的產(chǎn)品。
產(chǎn)品名稱:PDH丙酮酸脫氫酶檢測試劑盒可見分光光度法
規(guī)格:50管/48樣
檢測方法:可見分光光度法
貨號:FS-01S63464
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
粗酶液提?。?/span>
1、細胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
上皮粘附分子(EPCAM)檢測試劑盒根瘤Guinea pig F-Box Protein 2(FBXO2) ELISA Kit
乙酰A羧化α(ACACα)檢測試劑盒球孢白僵Guinea pig BK (Bradykinin) ELISA Kit
纖維蛋白肽B(FPB)檢測試劑盒梭Guinea pig PLAA (Phospholipase A2 Activating Protein) ELISA Kit
含血管性血友病因子A域蛋白2(vWA2)檢測試劑盒大麥類芽胞桿Guinea pig AQP-2 (Aquaporin 2) ELISA Kit
腺苷脫(ADA)檢測試劑盒球孢白僵Guinea pig β Manase ELISA Kit
肌動蛋白γ1(ACTγ1)檢測試劑盒大蓋小皮傘Guinea pig MCAM (Melanoma Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit
轉錄激活因子5(ATF5)檢測試劑盒水生黃桿Guinea pig MART/Melan-A (Melanoma Marker A) ELISA Kit
轉錄激活因子6(ATF6)檢測試劑盒黏瓊脂芽孢桿Guinea pig C9 (Complement Component 9) ELISA Kit
血栓A2(TXA2)檢測試劑盒環(huán)狀芽胞桿Guinea pig ITLN1 (Intelectin 1/Omentin) ELISA Kit
血小板激活因子乙酰水解Ⅰb3(PAFAH1B3)檢測試劑盒水生拉恩氏Guinea pig UCP-2 (Uncoupling Protein 2, Mitochondrial) ELISA Kit
轉錄激活因子7(ATF7)檢測試劑盒釀酒酵母Guinea pig SOCS3 (Suppressors of Cytokine Signaling 3) ELISA Kit
絲蛋白12(PRSS12)檢測試劑盒詹氏桿Guinea pig SEMA3A (Semaphorin 3A) ELISA Kit
原鈣黏β2(PCDHβ2)檢測試劑盒溜曲霉Guinea pig FSH (Follicle-Stimulating Hormone) ELISA Kit
腺苷環(huán)化2(ADCY2)檢測試劑盒米根霉Guinea pig TGF-α (Transforming Growth Factor α) ELISA Kit
脂多糖結合蛋白(LBP)檢測試劑盒茸毛褐褶Guinea pig ACTg1 (Actin Gamma 1) ELISA Kit
PDH丙酮酸脫氫酶檢測試劑盒可見分光光度法烯酰 Standard for GC,≥99.8% (GC)蔗糖 超純級 純度≥99.9%;RNase,DNase FreeAnti-L-enk/FITC 熒光標記抗亮腦啡肽抗體IgG
烯酰 超純級,99.9%蔗糖 ARAnti- Beta-lactoglobulin/FITC 熒光標記牛β-乳球蛋白抗體IgG
金O 80%,用于生物染色蔗糖 CPAnti- Beta-lactoglobulin/FITC 熒光標記牛β-乳球蛋白抗體IgG
金O 90%,用于生物染色蔗糖 ACSAnti- Beta-lactoglobulin/FITC 熒光標記牛β-乳球蛋白抗體IgG
2,2′-聯(lián)-雙(3-乙基并噻唑啉-6-磺)二鹽 98%蔗糖 分析標準品Anti-Laminin alpha5/FITC 熒光標記層粘蛋白α5抗體IgG
腺苷-5′-三磷二鈉鹽,三水 98%蔗糖 用于分子生物學, ≥99.5% (HPLC)Anti-LAG-3/CD223/FITC 熒光標記活化基因-3抗體IgG
放線菌D 98%(劇品)蔗糖 用于或昆蟲培養(yǎng), ≥99.5% (GC)Anti-lamin A/FITC 熒光標記核纖層蛋白A抗體IgG
牛血清白蛋白 96%蔗糖 用于植物培養(yǎng)Anti-Laminin Beta1/FITC 熒光標記層粘連蛋白β1抗體IgG
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