ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類(lèi)型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
Microbacrium│paraoxydans 類(lèi)似氧化微桿菌Microbacrium│paraoxydans分離基物:沉積物/日本海溝沉積物凍干物模式菌株:no生物活性微生物/潛在的抗腫瘤活性1003生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Thalassospira│lucennsis 盧森坦海旋菌Thalassospira│lucennsis分離基物:沉積物/深海沉積物凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no1.海洋石油污染生物修復(fù);2.生物活性物質(zhì)篩選821生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Idiomarina│seosinensis 瑞山海源菌Idiomarina│seosinensis分離基物:沉積物/深海表層沉積物凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no1.海洋石油污染生物修復(fù); 2.生物活性物質(zhì)篩選821生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Nitratireductor│aquibiodomus 生態(tài)館硝鹽還原菌Nitratireductor│aquibiodomus分離基物:樣/深層海凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no1.生物降解；2.生物催化；3.生物活性物質(zhì)篩選；4.海洋微生物生態(tài)學(xué)研究。471生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%

Bacillus│halmapalus 鹽敏芽胞桿菌Bacillus│halmapalus分離基物:沉積物/表層沉積物斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no近海細(xì)菌471生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%

Geobacillus│subrraneus 地下地芽孢桿菌Geobacillus│subrraneus分離基物:土灰色沉積物斜面培養(yǎng)物模式菌株:no端微生物/高溫菌(55℃)471生長(zhǎng)條件:55℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%

Geobacillus│kaustophilus 好熱地芽孢桿菌Geobacillus│kaustophilus分離基物:深海沉積物斜面培養(yǎng)物模式菌株:no大洋細(xì)菌471生長(zhǎng)條件:55℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%

Anoxybacillus│pushchinoensis 普西諾無(wú)氧芽孢菌Anoxybacillus│pushchinoensis分離基物:樣/上層溫泉斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no端微生物/高溫菌(70℃)471生長(zhǎng)條件:70℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%
β-OHB人β羥丁酸ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理CD63/MLA1  黑色素瘤相關(guān)抗原抗體格列風(fēng)內(nèi)酯釷鋯試劑Human sFLT-1(Receptor for Vascular Endothelial cell Growth Factor VEGF) ELISA KIT

CD64/IGFR1  免疫球蛋白G Fc段受體I梣釷鋯試劑Human PSMA(Prostate specific membrane antigen) ELISA KIT

CD66a/CEACAM1  癌胚抗原相關(guān)粘附分子1抗體白鮮4,6-二甲氧基吲哚Human SORT1(Sortilin 1) ELISA Kit

PTEN/MMAC1(NT)  一種腫瘤抑制基因抗體（N端）紫菀9-溴-10-苯基蒽Human NID2 (Nidogen 2) ELISA Kit

PTEN/MMAC1(CT)  一種腫瘤抑制基因抗體（C端）二氫歐山芹當(dāng)歸酯9-溴-10-苯基蒽Human ICA(islet cell antibody)ELISA Kit

Phospho-PTEN (Ser380)  磷化腫瘤抑制基因PTEN抗體白頭翁皂苷B49-溴-10-苯基蒽Human Peth(Phosphatidylethanol)ELISA Kit

Phospho-PTEN (Ser380/Thr382/Thr383)  磷化腫瘤抑制基因PTEN抗體石吊蘭甲素1-溴-2,4,6-三苯Human MAC (Membrane Attack Complex) ELISA Kit

PGE2  前列腺素E2抗體次野鳶尾黃素1-溴-2,4,6-三苯Human 25(OH)D(25-Hydroxy Vitamin D) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)