姬姆薩染色試劑盒-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號(hào)	FS-X9845

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

中文名稱：姬姆薩染色試劑盒

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：80ml|700ml

貨號(hào)：FS-X9845

產(chǎn)品介紹:

姬姆薩染色液是采用優(yōu)質(zhì)試劑原料和經(jīng)典配方配制，主要用于血液和骨髓涂片染色。姬姆薩染色液對(duì)胞漿著色力較強(qiáng)，能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度，特別是對(duì)血液和骨髓細(xì)胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜堿性顆粒，著色清晰，但是對(duì)胞核結(jié)構(gòu)顯色不佳，故常與瑞氏染液聯(lián)合使用。

儲(chǔ)存條件：室溫密封保存。

有效期：一年。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

鹽洛美利英文名： Lomefloxacin HCl結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1抗體包裝10MG

鹽馬尼地平英文名： Lomefloxacin HClⅡ型膠原α1蛋白/軟骨鈣抗體包裝100mg

鹽美西律（慢心率）英文名： Loteprednol EtabonateCSMD2蛋白抗體包裝500mg

鹽尼非卡蘭英文名： Loteprednol EtabonateCSMD3蛋白抗體包裝1g

鹽尼卡地平英文名： Lovastatin,Monacolin K鈣調(diào)神經(jīng)磷CSTP1抗體包裝250mg

鹽普拉格雷英文名： Lovastatin,Monacolin KCTAGE6蛋白抗體包裝1g

鹽普魯英文名： Lubiprostone皮膚T淋巴瘤相關(guān)抗原4抗體包裝1g

鹽曲美他英文名： Lypressin Acetate膜蛋白CLDND2抗體包裝25g

鹽索他洛爾英文名： Matrixyl Acetate含半胱和組豐富域蛋白1抗體包裝5g

鹽特拉唑英文名： Meclofenoxate HCl豬圓環(huán)病Ⅱ型衣殼蛋白包裝5g

鹽替羅非班英文名： Meclofenoxate HCl抗菌肽CAMP抗體包裝1g

鹽維拉帕米英文名： Megestrol Acetate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白134抗體包裝5g

依那普利拉英文名： Megestrol Acetate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白69抗體包裝1g

依普利英文名： Melanotan ⅡAcetate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白98抗體包裝5g

貝特英文名： Meloxicam卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白70抗體包裝1g

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR循環(huán)免疫復(fù)合物試劑盒鹽藥根堿;Jatrorrhizine

黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格：>98%血影蛋白試劑盒銀杏內(nèi)酯C;Ginkgolide C

細(xì)腳擬青霉Paecilomyces tenuipes 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α試劑盒葉;Folic acid
姬姆薩染色試劑盒Sphingobium amiense 2-氨基-4,5-雙(2-甲氧基乙氧基)苯活化VIIa

大豆慢生根瘤 2,4-二苯蛋白質(zhì)羰基化合物

粘質(zhì)沙雷氏 2,4-二芐蛋白質(zhì)亞硝基化

藤黃微球 2-溴-9-苯基-9H-咔唑一氧化氮代謝產(chǎn)物

毛栓孔 1-(5-吡啶-2-基)乙酮C型膠原蛋白

糙孢籃狀 5-(3--2-氟苯甲基)-2,4-二甲氧20-羥基蛻皮

大球蓋菇二氫-2,4,6-基-1,3,5-(4H)二噻I型膠原交聯(lián)羧基端肽

韓國(guó)鞘氨單胞 3-[(2-)氨基]促胰島生長(zhǎng)

*正紅菇 3-[(2-)氨基]晚期糖基化終產(chǎn)物特異性受體

釀酒酵母 4-[(N-叔丁氧羰基)氨甲基]苯骨成型蛋白3

多汁乳菇 2-苯基肺炎支原體IgG抗體

淺黃微桿 2-羥基萘-1-羧甲酯涎液化糖鏈抗原6

榛針孢酵母 2-氟-6-(二氟甲氧基)吡氨基肽A

腸膜明串珠腸膜亞種 4-溴吡啶-2(1H)-酮AMPA離子能谷受體1

乳桿屬鄰乙氧基星形膠質(zhì)源性蛋白
操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)