產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱：狗腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞    

產(chǎn)品英文：MDCK

貨號：FS-01X9755

細(xì)胞培養(yǎng)條件：MEM+10%FBS+1%P/S  

生長狀態(tài)：貼壁生長

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

是否提供細(xì)胞STR鑒定：不提供STR鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）37

運(yùn)輸溫度（℃）：常溫   

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項(xiàng)：

實(shí)驗(yàn)報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人抗副流感病毒IgG抗體(anti-PIV IgG )ELISA試劑盒 英文名稱：Human Poliomyelitis Virus,PV-IgG ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人大皰性類天皰瘡抗體(BP)ELISA試劑盒英文名稱：Human Bullous Pemphigoid,BP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人腸病毒(Enterovirus)ELISA試劑盒英文名稱：Human Enterovirus ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人冠狀病毒(Coronaviruses IgG)ELISA試劑盒英文名稱：Human Coronaviruses IgG ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人不耐熱腸毒B亞單位(LTB)ELISA試劑盒 英文名稱：Human heat-labile enterotoxin B subunit,LTB ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人阿米巴(Amebiasis)ELISA試劑盒英文名稱：Human Amebiasis ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人白喉抗體(Diphtheria Ab)ELISA試劑盒英文名稱：Human Diphtheria antibody ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人囊蟲病抗體(CYT Ab)ELISA試劑盒英文名稱：Human Cysticercosis antybody,CYT Ab ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人利什曼原蟲抗體(Leishimaria Ab)ELISA試劑盒英文名稱：Human Leishimaria antibody ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)ELISA試劑盒英文名稱：Human cicatricial Pemphigoid,CP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBV preS2Ab)ELISA試劑盒英文名稱：human hepatitis B virus,HBV preS2Ab ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA試劑盒英文名稱：human hepatitis B virus,HBV preS2Ag ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)ELISA試劑盒英文名稱：human transfusion transmitted virus,TTV ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人去加壓/1-去基-8-右旋-精加壓(dDAVP)ELISA試劑盒英文名稱：Human /1-desamino-8-D-arginine vasopressin,dDAVP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人毒蕈堿型乙酰受體亞型M3(M-AChR M3)ELISA試劑盒英文名稱：Human muscarinic acetylcholine receptor M3,M-AChR M3 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

人毒蕈堿型乙酰受體(M-AChR)ELISA試劑盒 英文名稱：Human muscarinic acetylcholine receptor,M-AChR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人食欲受體(OXR)ELISA試劑盒英文名稱：Human Orexin receptor,OXR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人真胰島(TI)ELISA試劑盒 英文名稱：Human true insulin,TI ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
狗腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞PLRP1/PNLIPRP1  胰脂肪相關(guān)蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml

BMP15  骨形態(tài)發(fā)生蛋白15抗體規(guī)格: 0.1ml

BCAT1  胞漿支鏈基轉(zhuǎn)抗體規(guī)格: 0.1ml

BMP5  骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體規(guī)格: 0.1ml

Hepatic lipase  肝脂抗體規(guī)格: 0.2ml

GABA Transporter 1/GAT-1  γ基丁運(yùn)載蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml

PAPPA  妊娠相關(guān)血漿蛋白A抗體規(guī)格: 0.1ml

PPT1  棕櫚酰蛋白硫酯1抗體規(guī)格: 0.2ml