ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
石骨癥相關(guān)蛋白PLEKHM1抗體英文全稱Angiopoietin 1英文簡(jiǎn)稱ANG-1 檢測(cè)范圍:7473nmol/L-4000pg/mL

增殖相關(guān)蛋白NANOS2抗體英文全稱cortisone英文簡(jiǎn)稱cortisone 檢測(cè)范圍:6703nmol/L-1000pg/ml

增殖相關(guān)蛋白NANOS1抗體英文全稱Parvovirus IgG antibody英文簡(jiǎn)稱CPV-IgG 檢測(cè)范圍:6687nmol/L-800ng/mL

樣蛋白1樣蛋白抗體英文全稱βcross linked C-opeptide of type I collagen 英文簡(jiǎn)稱β-CTX 檢測(cè)范圍:4391nmol/L-8ng/mL

核因子GCNF/維甲受體相關(guān)受體抗體英文全稱Cytochrome P450 2d12英文簡(jiǎn)稱cyp2d12 檢測(cè)范圍:4556nmol/L-100U/L

發(fā)育相關(guān)蛋白DAZL抗體英文全稱Lysophosphatidylcholine Acyltransferase2英文簡(jiǎn)稱LPCAT2 檢測(cè)范圍:2927nmol/L-1000ng/mL

生長(zhǎng)終止特異性同源盒基因抗體英文全稱ACA英文簡(jiǎn)稱ACA 檢測(cè)范圍:4766nmol/L-200ng/mL

生長(zhǎng)因子受體結(jié)合適應(yīng)蛋白抗體英文全稱protein tyrosine phosphatase antibody英文簡(jiǎn)稱IA-2A 檢測(cè)范圍:4298nmol/L-200ng/mL

Isoluminol 規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)　接頭蛋白DOK7抗體

Bis[3,4,6-trichloro-2-(pentyloxycarbonyl)phenyl]Oxalate 規(guī)格：>98.0%(HPLC)　腺樣癌特異性相關(guān)抗原EMC1抗體

Disodium8-Amino-1,3,6-naphthalene3sulfonateHydrate 規(guī)格：>99.0%(HPLC)(T)　磷化上皮癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體

Coumarin102 規(guī)格：>97.0%(HPLC)(N)　早期發(fā)育調(diào)控蛋白1抗體

Coumarin314 規(guī)格：>98.0%(HPLC)(N)　紅膜相關(guān)蛋白ERMAP抗體

FluoresceinChloride 規(guī)格：>90.0%(HPLC)　ETS相關(guān)蛋白71抗體

2',7'-Dichlorofluorescein 規(guī)格：>95.0%(HPLC)　外胚層發(fā)育不良蛋白1抗體

2,3-Diaminonaphthalene 規(guī)格：>98.0%(GC)(T)　軟骨素蛋白多糖3抗體

DimidiumBromide 規(guī)格：>95.0%(HPLC)(N)　EYA3蛋白抗體

抑制素B(INH-B)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

胸表達(dá)趨化因子(BRAK/CXCL14)酶聯(lián)免疫試劑盒 Human Breast and kidney expressed chemokine,BRAK ELISA Kit

線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ活性測(cè)試盒 紫外分光光度法 25管/24樣

Ratlymphocytefactor酶聯(lián)免疫試劑盒淋巴因子酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humangrowth-regulatedoncogeneγ/melanomagrowthstimulatingactivity,GROγ/MGSA酶聯(lián)免疫試劑盒生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanLeptospiraIgG，LepIgGELISAKit鉤端螺旋體IgG(LepIgG)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T

Clara分泌蛋白(CC-SP)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

兔去(NA)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rabbit Noradrenaline,NA ELISA Kit

前列環(huán)素(PGI)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： PGI ELISA Kit

rabbitInsulin,INS酶聯(lián)免疫試劑盒胰島素(INS)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humanai-redcellaibody酶聯(lián)免疫試劑盒抗紅抗體(RBC)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humancholecystokininoctapeptide，CCK-8ELISAKit膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
NO人一氧化氮ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理IL-7/FITC   熒光素標(biāo)記白介素7抗體IgG3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框19抗體3--4'-苯Rat Ta1 (Thymosin-α1) ELISA Kit

Il-7R a/CD127 /FITC  熒光素標(biāo)記白介素-7受體a抗體IgG色素c氧化酶5A抗體1,5-環(huán)辛二烯(六乙酰)(I)銥Rat LEPR (Leptin Receptor) ELISA Kit

IL-8/FITC   熒光素標(biāo)記兔抗人、牛、豬、羊、兔白介素8抗體IgG卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白60抗體二(2,6,10-十二碳三烯-1,12-二基)釕(IV)Rat PCIII (Procollagen III) ELISA Kit

IL-9/FITC   熒光素標(biāo)記白介素9抗體IgG卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白144A抗體2--4-羥基苯甲R(shí)at fT3 (Free Triiodothyronine) ELISA Kit

IL-10/FITC   熒光素標(biāo)記白介素10抗體IgG周期素B3抗體4-Rat 5-HIAA (5-Hydroxyindolacetic Acid) ELISA Kit

IL-10R/CD210/FITC  熒光素標(biāo)記白介素-10受體抗體IgG羧肽酶X(M14家族2)抗體4-Rat FLAP (5-Lipoxygenase Activating Protein) ELISA Kit

IL-10R Beta/IL10RB/CDw210b/FITC  熒光素標(biāo)記白介素-10受體β抗體IgG上皮鈣粘附分子結(jié)合蛋白E7乙酰乙鋰Rat PON1 (Paraoxonase 1) ELISA Kit

IL-11/FITC  熒光素標(biāo)記白介素11抗體IgG周期素D結(jié)合蛋白1抗體乙酰乙鋰Rat DNMT1 (DNA Methyltransferase 1) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)