當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TBMP-6人骨形成蛋白6ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
PCDH1人原鈣黏素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
LTA人淋巴毒素αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ALDH人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅫ人凝血因子ⅫELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | BMP-6人骨形成蛋白6ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human Bone Morphogenetic Protein 6, BMP-6 Elisa Kit |
貨號 | FS-H63738 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Cryobacrium│arcticum 冷桿菌(加詞待譯)Cryobacrium│arcticum分離基物:沉積物/巧克力色沉積物凍干物模式菌株:no地細(xì)菌471生長條件:15℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:>98%
Halobacillus│alkaliphilus 嗜喜鹽芽孢桿菌Halobacillus│alkaliphilus分離基物:沉積物/巧克力色沉積物凍干物模式菌株:no產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)蛋白酶菌株;端微生物/耐鹽菌471生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:Mw <100,000 ,35 wt. % 溶液,100-200 cP(25 °C)
Sulfitobacr│sp. 亞鹽桿菌Sulfitobacr│sp.分離基物:沉積物/深灰色沉積物凍干物模式菌株:no產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)脂肪酶菌株(三丁甘油酯法)471生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Halobacillus│locisalis 鹽地喜鹽芽孢桿菌Halobacillus│locisalis分離基物:沉積物/深灰色沉積物凍干物安全等級:1模式菌株:no產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)蛋白酶菌株;端微生物/耐鹽菌471生長條件:15℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Alkalibacrium│sp. 嗜菌Alkalibacrium│sp.分離基物:沉積物/褐棕色沉積物凍干物模式菌株:no端微生物/耐菌(pH11)821生長條件:15℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥98%
Halomonas│saccharevitans 寡用糖鹽單胞菌Halomonas│saccharevitans分離基物:沉積物/深灰色沉積物凍干物模式菌株:no端微生物/耐菌(pH11)821生長條件:15℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:AR
Citreicella│thiooxidans 硫氧化檸檬胞菌Citreicella│thiooxidans分離基物:樣/上層海凍干物模式菌株:no海洋細(xì)菌471生長條件:15℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Photobacrium│angustum 狹發(fā)光桿菌Photobacrium│angustum分離基物:樣/上層海凍干物模式菌株:no海洋細(xì)菌471生長條件:15℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
BMP-6人骨形成蛋白6ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理Polycystin 2 多囊腎蛋白2抗體2”-O-沒食子?;鸾z桃苷3,4-二甲氧基肉桂Human LOXL4 (Lysyl Oxidase Like Protein 4 ) ELISA Kit
PP-1B 蛋白磷酯酶-1B抗體9-甲氧基喜樹3,4-二甲氧基肉桂Human TNFRSF1B (Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 1B) ELISA Kit
PP2A alpha 蛋白質(zhì)磷酶-2A抗體鹽石蒜3,4-二甲氧基肉桂Human ACCPA (anti-cyclic citrullinated peptide antibody) ELISA Kit
PP2A alpha 蛋白質(zhì)磷酶-2A抗體光甘草定3--4-(基)苯甲Human LL-37 (Antibacterial Protein LL-37) ELISA Kit
PP2Ac 磷酯酶-2Ac抗體橙黃決明素羥基檸檬Human Tα1 (Thymosin-α1) ELISA Kit
PPAR-delta/beta D型-過氧化酶活化增生受體抗體荷葉羥基檸檬Human PS1 (Presenilin 1) ELISA Kit
PPAR alpha α型-過氧化酶活化增生受體抗體鷹嘴豆芽素A利托君鹽鹽Human PACAP-38 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 38) ELISA Kit
PPAR Gamma 過氧化酶活化增生受體γ抗體10-羥基喜樹利托君鹽鹽Human PACAP-27 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 27) ELISA Kit
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